Proizvodi

Opis:tanshinone I je tip IIA humani rekombinantni sPLA2 i zečji rekombinantni cPLA2 inhibitor sa IC50 od 11 μM, odnosno 82 μM。

Povezane kategorije:signalni putevi > > metabolički enzimi /
proteaze > > fosfolipidi
Oblast istraživanja > > kardiovaskularne bolesti
Prirodni proizvodi > > Kinoni

Cilj:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro studija:tanšinon I je inhibirao stvaranje PGE2 pomoću sirovih makrofaga indukovanih LPS-om (IC50 = 38 μM)。 Kada su tanšinon I i LPS dodani u isto vrijeme, spoj je značajno inhibirao proizvodnju M od 10-100 μ PGE2 (IC50 = 38 μM). ）。 Kada se doda nakon potpune indukcije COX-2, tanshinone I je također smanjio proizvodnju PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 Činjenica da tanshinone I inhibira proizvodnju PGE 2 kroz unaprijed induciran COX-2 snažno sugerira da spoj može direktno inhibiraju aktivnost COX-2 i/ili utiču na aktivnost PLA2. Kada je tanshinone I inkubiran sa dva različita oblika fosfolipaze A2 (PLA2), značajno je inhibirao sPLA2 na način ovisan o koncentraciji (IC50 = 11) μM). potencija, tanshinone I je također inhibirao cPLA2 (IC50 = 82) μ M)[1]

In vivo studija:tanshinone I pokazao je protuupalno djelovanje kod karagenanom induciranog edema šape i artritisa izazvanog adjuvansom kod pacova.Kako bi se utvrdilo protuupalno djelovanje tanšinona I, korišteni su klasični životinjski modeli akutne i kronične upale [edem šape induciran karagenanom (CGN) i artritis induciran adjuvansom štakora (AIA)].Kada se oralno koristi tanšinon I, pokazao je značajnu antiinflamatornu aktivnost protiv edema šape izazvanog CGN (47% inhibicije pri 160 mg/kg), dok je IC50 indometacina bio 7,1 mg/kg.U AIA, tanshinone I je dao 27% inhibicije sekundarne upale 18. dana u oralnoj dozi od 50 mg/kg/dan, dok je prednizolon (5 mg/kg/dan) pokazao efikasnu inhibiciju (65%) [1]

Eksperiment s kinazom:kao izvor PLA2, humani rekombinantni sPLA2 (tip IIA) je pročišćen iz CHO ćelija transficiranih PLA2 genom, a zečji rekombinantni trombocitni cPLA2 je dobijen njegovom ekspresijom u bakulovirusu.Standardna reakciona smeša (200) μ 50) Sadržala je 100 mm Tris HCl pufera (pH 9,0), 6 mM CaCl2 i 20 nmol 1-acil - [1-14C] - arahidonil Sn glicerol fosfat etanolamin (2000 CPM).Ili nije bilo tanšinona I. Reakcija je započela dodavanjem 50NG prečišćenog sPLA2 ili cPLA2.Nakon 20 minuta na 37 ℃, analizirane su proizvedene slobodne masne kiseline.Pod ovim standardnim uslovima, oko 10% slobodnih masnih kiselina se oslobađa iz dodanog fosfolipidnog supstrata u reakcionoj smeši bez tanšinona I [1].

Eksperiment sa ćelijama:sirovih 264,7 ćelija kultivisano je sa DMEM sa dodatkom 10% FBS i 1% antibiotika na 37 ℃ ispod 5% CO2.Ukratko, ćelije su zasejane na ploče sa 96 jažica (2) × 10 (5 ćelija/jamici).Osim ako nije drugačije naznačeno, dodani su LPS (1ug/ml) i tanshinone I i inkubirani 24 sata.Koncentracija PGE2 u mediju je izmjerena korištenjem EIA kompleta za PGE2.Da bi se odredio efekat tanšinona I na proizvodnju PGE 2 nakon indukcije COX-2, ćelije su mešane sa LPS (1 μG/ml) tokom 24 sata i temeljito isprane.Zatim je dodat tanšinon I bez LPS-a i ćelije su kultivisane još 24 sata.Koncentracija PGE2 je izmjerena iz podloge.MTT test je korišten za ispitivanje citotoksičnosti tanšinona I na sirovim stanicama.Tanshinone I na 100 μM nije pokazao nikakvu citotoksičnost [1].

Eksperiment na životinjama:Da bi se procijenila inhibitorna aktivnost tanšinona I na modelima akutne i kronične upale životinja, korišteni su modeli edema šape induciranog karagenanom (CGN) pacova i artritisa izazvanog adjuvansom (AIA).Ukratko, 1% CGN rastvoren u fiziološkom rastvoru bez pirogena (0,05 ml) je ubrizgan u desnu zadnju šapu pacova za test edema šape.Nakon 5 sati, pletizmografom je izmjereno oticanje tretiranih kandži.Tanshinone I rastvoren u 0,5% CMC je davan oralno 1 sat pre CGN injekcije.Za AIA test, artritična upala je izazvana ubrizgavanjem Mycobacterium lactis (0,6ml/pacov) rastvorenog u mineralnom ulju u desnu zadnju šapu pacova.Tanshinone sam davao oralno svaki dan.Širenje tretiranih i neobrađenih kandži je mjereno pletizmografom.

Reference:[1] Kim SY, et al.Učinci tanshinona I izoliranog iz Salvia miltiorrhiza bunge na metabolizam arahidonske kiseline i in vivo upalne odgovore.Phytother Res.2002 Nov;16(7):616-20.