Tuotteet

Kuvaus:tanshinoni I on tyypin IIA ihmisen rekombinantti sPLA2- ja Rabbit Rekombinantti cPLA2-inhibiittori, jonka IC50 on vastaavasti 11 μM ja 82 μM.

Aiheeseen liittyvät luokat:signalointireitit >> metaboliset entsyymit /
proteaasit >> fosfolipidit
Tutkimusala >> sydän- ja verisuonitaudit
Luonnontuotteet >> Kinonit

Kohde:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro -tutkimus:tanshinoni I esti PGE2:n muodostumista LPS-indusoitujen raakamakrofagien toimesta (IC50 = 38 μM）。 Kun tanshinoni I ja LPS lisättiin samanaikaisesti, yhdiste esti merkittävästi 10-100 μ PGE2:n M:n tuotantoa (IC50 = 38 μM). ）。 Kun tanshinoni I lisättiin COX-2:n täydellisen induktion jälkeen, se vähensi myös PGE2:n tuotantoa (IC50 = 46) μM）。 Se tosiasia, että tanshinoni I estää PGE 2:n tuotantoa esi-indusoidun COX-2:n kautta, viittaa vahvasti siihen, että yhdiste voi inhiboi suoraan COX-2-aktiivisuutta ja/tai vaikuttaa PLA2-aktiivisuuteen.Kun tanshinoni I:tä inkuboitiin kahden fosfolipaasi A2:n (PLA2) eri muodon kanssa, se inhiboi merkittävästi sPLA2:ta konsentraatioriippuvaisella tavalla (IC50 = 11) μM). teho, tanshinoni I esti myös cPLA2:ta (IC50 = 82) μM）[1]

In vivo -tutkimus:tanshinoni I osoitti anti-inflammatorista aktiivisuutta karrageenin aiheuttamassa käpälän turvotuksessa ja adjuvantin aiheuttamassa niveltulehduksessa rotilla.Tanshinoni I:n anti-inflammatorisen aktiivisuuden määrittämiseksi käytettiin klassisia akuutin ja kroonisen tulehduksen eläinmalleja [rotan karrageenin (CGN) aiheuttama käpälän turvotus ja rotan adjuvantin aiheuttama niveltulehdus (AIA)].Suun kautta otettu tanshinoni I osoitti merkittävää anti-inflammatorista aktiivisuutta CGN:n aiheuttamaa käpälän turvotusta vastaan ​​(47 %:n esto annoksella 160 mg/kg), kun taas indometasiinin IC50 oli 7,1 mg/kg.AIA:ssa tanshinoni I esti 27 % sekundaarista tulehdusta päivänä 18 oraalisella annoksella 50 mg/kg/vrk, kun taas prednisoloni (5 mg/kg/vrk) esti tehokkaan (65 %) [1]

Kinaasikoe:PLA2:n lähteenä ihmisen rekombinantti sPLA2 (tyyppi IIA) puhdistettiin CHO-soluista, jotka oli transfektoitu PLA2-geenillä, ja kanin rekombinanttiverihiutale cPLA2 saatiin ekspressoimalla bakuloviruksessa.Standardireaktioseos (200) μ 50) Se sisälsi 100 mm Tris HCl -puskuria (pH 9,0), 6 mM CaCl2:a ja 20 nmol 1-asyyli-[1-14C]-arakidonyyli-Sn-glyserolifosfaattietanoliamiinia (2000 CPM //CPM).Tai ei ollut tanshinoni I:tä. reaktio aloitettiin lisäämällä 50 NG puhdistettua sPLA2:ta tai cPLA2:ta.20 minuutin kuluttua 37 °C:ssa tuotetut vapaat rasvahapot analysoitiin.Näissä standardiolosuhteissa noin 10 % vapaista rasvahapoista vapautuu lisätystä fosfolipidisubstraatista reaktioseoksessa ilman tanshinonia I [1].

Solukoe:Raakoja 264.7-soluja viljeltiin DMEM:llä, jota oli täydennetty 10 % FBS:llä ja 1 % antibiootilla, 37 °C:ssa 5 % C02:ssa.Lyhyesti sanottuna solut kylvettiin 96-kuoppaisille levyille (2) × 10 (5 solua/kuoppa).Ellei toisin mainita, LPS (1 ug/ml) ja tanshinoni I lisättiin ja inkuboitiin 24 tuntia.PGE2-pitoisuus väliaineessa mitattiin käyttämällä PGE2:n EIA-sarjaa.Tanshinoni I:n vaikutuksen PGE2:n tuotantoon määrittämiseksi COX-2-induktion jälkeen soluja sekoitettiin LPS:n kanssa (1 µG/ml) 24 tunnin ajan ja pestiin perusteellisesti.Sitten lisättiin tanshinoni I ilman LPS:ää ja soluja viljeltiin vielä 24 tuntia.PGE2-pitoisuus mitattiin alustasta.MTT-määritystä käytettiin tanshinoni I:n sytotoksisuuden tutkimiseen raakasoluilla.Tanshinone I pitoisuutena 100 µM ei osoittanut mitään sytotoksisuutta [1].

Eläinkoe:tanshinoni I:n inhiboivan aktiivisuuden arvioimiseksi akuutissa ja kroonisessa tulehduksellisessa eläinmalleissa käytettiin rotan karrageenin (CGN) aiheuttaman käpälän turvotuksen ja adjuvantti-indusoidun niveltulehduksen (AIA) malleja.Lyhyesti sanottuna 1 % CGN liuotettuna pyrogeenittomaan suolaliuokseen (0,05 ml) injektoitiin rottien oikeaan takakäpälään käpälän turvotusta varten.5 tunnin kuluttua käsiteltyjen kynsien turvotus mitattiin käyttämällä pletysmografia.Tanshinone I liuotettuna 0,5 % CMC:hen annettiin suun kautta 1 tunti ennen CGN-injektiota.AIA-testiä varten niveltulehdus indusoitiin injektoimalla Mycobacterium lactista (0,6 ml/rotta) mineraaliöljyyn liuotettuna rottien oikeaan takakäpälään.Tanshinone minulle annettiin suun kautta joka päivä.Käsiteltyjen ja käsittelemättömien kynsien laajeneminen mitattiin pletysmografilla.

Viitteet:[1] Kim SY, et ai.Salvia miltiorrhiza bungesta eristetyn Tanshinone I:n vaikutukset arakidonihapon aineenvaihduntaan ja in vivo -tulehdusvasteisiin.Phytother Res.2002 marraskuu;16(7):616-20.