Termékek

Leírás:A tanshinone I egy IIA típusú humán rekombináns sPLA2 és nyúl rekombináns cPLA2 inhibitor, IC50-értéke 11 μM, illetve 82 μM.

Kapcsolódó kategóriák:jelátviteli útvonalak > > metabolikus enzimek /
proteázok > > foszfolipidek
Kutatási terület > > szív- és érrendszeri betegségek
Természetes termékek >> Kinonok

Cél:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro vizsgálat:A tanshinon I gátolta a PGE2 képződését LPS-indukált nyers makrofágok által (IC50 = 38 μM）。 Tanshinon I és LPS egyidejű hozzáadásakor a vegyület szignifikánsan gátolta a 10-100 μ PGE2 M termelődését (IC50 = 38 μM). ）。 A COX-2 teljes indukciója után hozzáadva a tanshinon I a PGE2 termelését is csökkentette (IC50 = 46) μM）。 Az a tény, hogy a tanshinon I gátolja a PGE 2 termelődését az előindukált COX-2 révén, erősen arra utal, hogy a vegyület képes közvetlenül gátolja a COX-2 aktivitást és/vagy befolyásolja a PLA2 aktivitást. Amikor a tanshinon I-t a foszfolipáz A2 (PLA2) két különböző formájával inkubáltuk, koncentrációfüggő módon jelentősen gátolta az sPLA2-t (IC50 = 11) μM. Annak ellenére, hogy alacsony potencia, a tanshinon I gátolta a cPLA2-t is (IC50 = 82) μM）[1]

In vivo tanulmány:A tanshinone I gyulladáscsökkentő hatást mutatott patkányokban karragenánnal kiváltott mancsödémában és adjuváns indukálta ízületi gyulladásban.A tanshinon I gyulladásgátló hatásának megállapítására az akut és krónikus gyulladás klasszikus állatmodelljeit [patkány karragén (CGN) - indukált mancs ödéma és patkány adjuváns által kiváltott ízületi gyulladás (AIA)] alkalmaztuk.Orális tanshinon I esetén jelentős gyulladáscsökkentő hatást mutatott a CGN által kiváltott mancsödéma ellen (47%-os gátlás 160 mg/kg-nál), míg az indometacin IC50 értéke 7,1 mg/kg volt.Az AIA-ban a tanshinon I 27%-kal gátolta a másodlagos gyulladást a 18. napon 50 mg/ttkg/nap orális adagban, míg a prednizolon (5 mg/ttkg/nap) hatékony gátlást mutatott (65%) [1]

Kináz kísérlet:A PLA2 forrásaként a humán rekombináns sPLA2-t (IIA típus) tisztítottuk a PLA2 génnel transzfektált CHO sejtekből, és a nyúl rekombináns thrombocyta cPLA2-t bakulovírusban történő expressziójával nyertük.Standard reakcióelegy (200 μ 50) 100 mm Tris HCl puffert (pH 9,0), 6 mM CaCl2-t és 20 nmol 1-acil - [1-14C] - arachidonil Sn glicerin-foszfát etanol-amint (2000 CPM) tartalmazott.Vagy nem volt tanshinon I. a reakciót 50 NG tisztított sPLA2 vagy cPLA2 hozzáadásával indítottuk.20 perc elteltével 37 °C-on elemeztük a képződött szabad zsírsavakat.Ilyen standard körülmények között a szabad zsírsavak körülbelül 10%-a szabadul fel a tanshinon I nélküli reakcióelegyben hozzáadott foszfolipid szubsztrátból [1].

Sejtkísérlet:nyers 264.7 sejteket tenyésztettünk 10% FBS-sel és 1% antibiotikummal kiegészített DMEM-mel 37 °C-on 5% CO2 alatt.Röviden, a sejteket 96 lyukú lemezekre oltottuk (2 × 10 (5 sejt/lyuk).Hacsak másképpen nem jelezzük, LPS-t (1 ug/ml) és tanshinon I-t adtunk hozzá, és 24 órán át inkubáltuk.A PGE2 koncentrációját a tápközegben a PGE2 EIA kit segítségével mértük.Annak érdekében, hogy meghatározzuk a tanshinon I hatását a PGE 2 termelésre COX-2 indukció után, a sejteket LPS-sel (1 μG/ml) kevertük 24 órán át, majd alaposan mostuk.Ezután tanshinon I-t adtunk hozzá LPS nélkül, és a sejteket további 24 órán át tenyésztettük.A PGE2 koncentrációt a táptalajból mértük.MTT vizsgálatot alkalmaztunk a tanshinon I citotoxicitásának vizsgálatára nyers sejteken.A Tanshinone I 100 μM koncentrációban nem mutatott semmilyen citotoxicitást [1].

Állatkísérlet:A tanshinon I gátló hatásának értékelésére akut és krónikus gyulladásos állatmodelleken patkány karragén (CGN) - indukált mancs ödéma és adjuváns indukált ízületi gyulladás (AIA) modelleket alkalmaztunk.Röviden, pirogénmentes sóoldatban (0,05 ml) oldott 1%-os CGN-t fecskendeztünk patkányok jobb hátsó mancsába a mancsödéma vizsgálatához.5 óra elteltével pletizmográf segítségével megmértük a kezelt karmok duzzadását.A 0,5%-os CMC-ben oldott tanshinone I-t orálisan adtuk be 1 órával a CGN injekció előtt.Az AIA teszthez az ízületi gyulladást úgy váltottuk ki, hogy a patkányok jobb hátsó mancsába ásványolajban oldott Mycobacterium lactis-t (0,6 ml/patkány) fecskendeztünk be.A Tanshinone-t minden nap szájon át adták be.A kezelt és a kezeletlen karmok tágulását pletizmográf segítségével mértük.

Referenciák:[1] Kim SY, et al.A Salvia miltiorrhiza bunge-ból izolált Tanshinone I hatása az arachidonsav metabolizmusára és az in vivo gyulladásos válaszokra.Phytother Res.2002 nov.;16(7):616-20.