Produk

Keterangan:tanshinone I adalah inhibitor sPLA2 rekombinan manusia tipe IIA dan Rabbit Recombinant cPLA2 dengan IC50 masing-masing 11 M dan 82 M。

Kategori terkait:jalur pensinyalan > > enzim metabolik /
protease > > fosfolipid
Bidang penelitian > > penyakit kardiovaskular
Produk Alami >> Kuinon

Target:IC50: 11 M (sPLA2), 82 M (cPLA2)[1].

Studi In Vitro:tanshinone I menghambat pembentukan PGE2 oleh makrofag mentah yang diinduksi LPS (IC50 = 38 M）。 Ketika tanshinone I dan LPS ditambahkan pada saat yang sama, senyawa tersebut secara signifikan menghambat 10-100 PGE2 produksi M (IC50 = 38 M) Ketika ditambahkan setelah induksi lengkap COX-2, tanshinone I juga mengurangi produksi PGE2 (IC50 = 46) M）。 Fakta bahwa tanshinone I menghambat produksi PGE 2 melalui pra-induksi COX-2 sangat menunjukkan bahwa senyawa tersebut dapat secara langsung menghambat aktivitas COX-2 dan / atau mempengaruhi Aktivitas PLA2. Ketika tanshinone I diinkubasi dengan dua bentuk fosfolipase A2 (PLA2) yang berbeda, ia secara signifikan menghambat sPLA2 dengan cara yang bergantung pada konsentrasi (IC50 = 11) M).Meskipun rendah potensi, tanshinone I juga menghambat cPLA2 (IC50 = 82) M）[1]

Dalam Studi Vivo:tanshinone I menunjukkan aktivitas anti-inflamasi pada edema kaki yang diinduksi karagenan dan arthritis yang diinduksi adjuvant pada tikus.Untuk menetapkan aktivitas anti-inflamasi tanshinone I, model hewan klasik dari peradangan akut dan kronis [karagenan tikus (CGN) - edema kaki yang diinduksi dan artritis yang diinduksi adjuvant tikus (AIA)] digunakan.Ketika tanshinone I oral, itu menunjukkan aktivitas anti-inflamasi yang signifikan terhadap edema kaki yang diinduksi CGN (hambatan 47% pada 160 mg / kg), sedangkan IC50 indometasin adalah 7,1 mg / kg.Pada AIA, tanshinone I memberikan penghambatan inflamasi sekunder sebesar 27% pada hari ke 18 dengan dosis oral 50 mg/kg/hari, sedangkan prednisolon (5 mg/kg/hari) menunjukkan penghambatan yang efektif (65%)[1]

Percobaan Kinase:sebagai sumber PLA2, sPLA2 rekombinan manusia (tipe IIA) dimurnikan dari sel CHO yang ditransfeksi dengan gen PLA2, dan cPLA2 trombosit rekombinan kelinci diperoleh melalui ekspresinya dalam baculovirus.Campuran reaksi standar (200) 50) Mengandung 100 mm buffer Tris HCl (pH 9,0), 6 mM CaCl2 dan 20 nmol 1-asil - [1-14C] - arakidonil Sn gliserol fosfat etanolamin (2000 CPM / nmol).Atau tidak ada tanshinone I. reaksi dimulai dengan menambahkan sPLA2 atau cPLA2 yang dimurnikan 50NG.Setelah 20 menit pada suhu 37 , asam lemak bebas yang dihasilkan dianalisis.Di bawah kondisi standar ini, sekitar 10% asam lemak bebas dilepaskan dari substrat fosfolipid yang ditambahkan dalam campuran reaksi tanpa tanshinone I [1].

Eksperimen Sel:264,7 sel mentah dikultur dengan DMEM yang dilengkapi dengan 10% FBS dan 1% antibiotik pada 37 di bawah 5% CO2.Singkatnya, sel diunggulkan pada 96 pelat sumur (2) × 10 (5 sel / sumur).Kecuali dinyatakan lain, ditambahkan LPS (1ug/ml) dan tanshinone I dan diinkubasi selama 24 jam.Konsentrasi PGE2 dalam media diukur menggunakan kit EIA untuk PGE2.Untuk mengetahui pengaruh tanshinone I pada produksi PGE 2 setelah induksi COX-2, sel dicampur dengan LPS (1 G / ml) selama 24 jam dan dicuci sampai bersih.Kemudian, tanshinone I ditambahkan tanpa LPS dan sel dikultur selama 24 jam.Konsentrasi PGE2 diukur dari medium.Uji MTT digunakan untuk menguji sitotoksisitas tanshinone I pada sel mentah.Tanshinone I pada 100 M tidak menunjukkan sitotoksisitas apapun [1].

Eksperimen Hewan:untuk mengevaluasi aktivitas penghambatan tanshinone I pada model hewan inflamasi akut dan kronis, tikus karagenan (CGN) - induced paw edema dan model adjuvant induced arthritis (AIA) digunakan.Singkatnya, 1% CGN yang dilarutkan dalam saline bebas pirogen (0,05 ml) disuntikkan ke kaki kanan belakang tikus untuk uji edema kaki.Setelah 5 jam, pembengkakan cakar yang dirawat diukur menggunakan plethysmograph.Tanshinone I yang dilarutkan dalam 0,5% CMC diberikan secara oral 1 jam sebelum injeksi CGN.Untuk tes AIA, peradangan rematik diinduksi dengan menyuntikkan Mycobacterium lactis (0,6ml / tikus) yang dilarutkan dalam minyak mineral ke kaki belakang kanan tikus.Tanshinone I diberikan secara oral setiap hari.Perluasan cakar yang dirawat dan yang tidak diobati diukur menggunakan plethysmograph.

Referensi:[1] Kim SY, dkk.Efek Tanshinone I yang diisolasi dari Salvia miltiorrhiza bunge pada metabolisme asam arakidonat dan respons inflamasi in vivo.Phytother Res.2002 November;16(7):616-20.