מוצרים

תיאור:tanshinone I הוא מעכב sPLA2 רקומביננטי אנושי מסוג IIA ו-Rabbit Recombinant cPLA2 עם IC50 של 11 בהתאמה μM ו-82 μM.

קטגוריות קשורות:מסלולי איתות > > אנזימים מטבוליים /
פרוטאזות >> פוספוליפידים
תחום מחקר > > מחלות לב וכלי דם
מוצרים טבעיים > > קינונים

יַעַד:IC50: 11 מיקרומטר (sPLA2), 82 מיקרומטר (cPLA2)[1].

מחקר במבחנה:tanshinone I עיכב את היווצרות PGE2 על ידי מקרופאגים גולמיים המושרים על ידי LPS (IC50 = 38 μ M）。 כאשר הוספו Tanshinon I ו-LPS בו-זמנית, התרכובת עיכבה באופן משמעותי ייצור של 10-100 μ PGE2 של M (IC50 = 38 μM ）。 כאשר הוספה לאחר אינדוקציה מלאה של COX-2, טנשינון I גם הפחית את הייצור של PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 העובדה שטנשינון I מעכב ייצור PGE 2 באמצעות COX-2 שהושרה מראש מעידה מאוד על כך שהתרכובת יכולה מעכבים ישירות את פעילות COX-2 ו/או משפיעים על פעילות PLA2. כאשר טאנשינון I הודגרה עם שתי צורות שונות של פוספוליפאז A2 (PLA2), הוא עיכב באופן משמעותי את sPLA2 באופן תלוי ריכוז (IC50 = 11) μM). למרות הנמוך שלו. עוצמה, tanshinone I גם עיכב cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

מחקר in Vivo:tanshinone I הראה פעילות אנטי דלקתית בבצקת כף הרגל הנגרמת על ידי קרגנין ודלקת מפרקים הנגרמת באדג'ובנטי בחולדות.על מנת לבסס את הפעילות האנטי דלקתית של טנשינון I, נעשה שימוש במודלים קלאסיים של בעלי חיים של דלקת חריפה וכרונית [קרגנין עכברוש (CGN) - בצקת מושרה בכפות ודלקת מפרקים נגרמת על ידי חולדה (AIA)].כאשר Tanshinon I דרך הפה, הוא הראה פעילות אנטי דלקתית משמעותית נגד בצקת כף רגל הנגרמת על ידי CGN (עיכוב של 47% ב-160 מ"ג/ק"ג), בעוד שה-IC50 של אינדומתצין היה 7.1 מ"ג/ק"ג.ב-AIA, Tanshinon I נתן 27% עיכוב של דלקת משנית ביום 18 במינון פומי של 50 מ"ג/ק"ג ליום, בעוד פרדניזולון (5 מ"ג/ק"ג/יום) הראה עיכוב יעיל (65%) [1]

ניסוי קינאז:כמקור ל-PLA2, sPLA2 רקומביננטי אנושי (סוג IIA) טוהר מתאי CHO שהועברו בגן PLA2, ו-cPLA2 של טסיות רקומביננטיות של ארנב הושג באמצעות ביטויו ב-baculovirus.תערובת תגובה סטנדרטית (200) μ 50) היא הכילה חיץ Tris HCl 100 מ"מ (pH 9.0), 6 מ"מ CaCl2 ו-20 ננומול של 1-acyl - [1-14C] - ארכידוניל Sn גליצרול פוספט אתנולמין (2000 CPM / nmol).או שלא היה tanshinone I. התגובה התחילה על ידי הוספת 50NG sPLA2 או cPLA2 מטוהרים.לאחר 20 דקות ב-37 ℃, נותחו חומצות השומן החופשיות שנוצרו.בתנאים סטנדרטיים אלו משתחררים כ-10% מחומצות השומן החופשיות מהמצע הפוספוליפיד המוסף בתערובת התגובה ללא טנשינון I [1].

ניסוי תא:תאים גולמיים 264.7 תורבו עם DMEM בתוספת של 10% FBS ו-1% אנטיביוטיקה ב-37 ℃ מתחת ל-5% CO2.בקיצור, תאים נזרעו על צלחות של 96 באר (2) × 10 (5 תאים / באר).אלא אם צוין אחרת, נוספו LPS (1ug/ml) ו-tanshinon I והודגרו במשך 24 שעות.ריכוז PGE2 במדיום נמדד באמצעות ערכת EIA עבור PGE2.על מנת לקבוע את ההשפעה של tanshinone I על ייצור PGE 2 לאחר אינדוקציה של COX-2, תאים עורבבו עם LPS (1 מיקרוגרם / מ"ל) במשך 24 שעות ונשטפו ביסודיות.לאחר מכן, הוסיפו לי Tanshinon ללא LPS והתאים תורבו במשך 24 שעות נוספות.ריכוז PGE2 נמדד מהמדיום.בדיקת MTT שימשה לבחינת הציטוטוקסיות של tanshinone I על תאים גולמיים.Tanshinone I ב-100 μM לא הראה שום ציטוטוקסיות [1].

ניסוי בבעלי חיים:על מנת להעריך את הפעילות המעכבת של Tanshinon I על מודלים של בעלי חיים דלקתיים חריפים וכרוניים, נעשה שימוש במודלים של קרגנין עכברים (CGN) - המושרה בכפות ודלקת מפרקים (AIA).בקיצור, 1% CGN מומס במי מלח ללא פירוגן (0.05 מ"ל) הוזרק לכפה האחורית הימנית של חולדות לבדיקת בצקת בכפות.לאחר 5 שעות נמדדה הנפיחות של הטפרים המטופלים באמצעות plethysmograph.Tanshinone I מומס ב-0.5% CMC ניתן דרך הפה שעה אחת לפני הזרקת CGN.עבור בדיקת AIA, דלקת מפרקים נגרמה על ידי הזרקת Mycobacterium lactis (0.6 מ"ל / חולדה) מומס בשמן מינרלי לתוך הכפה האחורית הימנית של חולדות.טנשינון קיבלתי דרך הפה כל יום.התרחבות של טפרים מטופלים ולא מטופלים נמדדה באמצעות plethysmograph.

הפניות:[1] Kim SY, et al.השפעות של Tanshinone I שבודד מ- Salvia miltiorrhiza bunge על חילוף החומרים של חומצה ארכידונית ותגובות דלקתיות in vivo.Phytother Res.2002 נוב;16(7):616-20.