Өнімдер

Сипаттама:таншинон I – IIA типті адам рекомбинантты sPLA2 және Қоян рекомбинантты cPLA2 ингибиторы IC50 сәйкесінше 11 μ M және 82 μ M。

Қатысты санаттар:сигналдық жолдар > > метаболикалық ферменттер /
протеазалар > > фосфолипидтер
Ғылыми сала >> Жүрек-тамыр аурулары
Табиғи өнімдер > > Хинондар

Мақсат:IC50: 11 мкм (sPLA2), 82 мкм (cPLA2)[1].

In vitro зерттеу:таншинон I LPS индукцияланған шикі макрофагтармен PGE2 түзілуін тежеді (IC50 = 38 μ M）。 Таншинон I мен LPS бір уақытта қосылғанда, қосылыс M (IC50 = 38 μ M) 10-100 μ PGE2 түзілуін айтарлықтай тежеді. ）。 COX-2 толық индукцияланғаннан кейін қосылғанда, таншинон I сонымен қатар PGE2 (IC50 = 46) μ M өндірісін азайтты. Таншинон I алдын ала индукцияланған COX-2 арқылы PGE 2 өндірісін тежейтіні бұл қосылыстың мүмкін екенін көрсетеді. COX-2 белсенділігін тікелей тежейді және/немесе PLA2 белсенділігіне әсер етеді.Таншинон I фосфолипазаның A2 (PLA2) екі түрлі формасымен инкубациялағанда, ол sPLA2 концентрациясына тәуелді түрде (IC50 = 11) μ M) айтарлықтай тежейді). потенциал, таншинон I сонымен қатар cPLA2 (IC50 = 82) μ M） [1] тежейді

In Vivo зерттеуі:таншинон I егеуқұйрықтарда каррагеннен туындаған табан ісінуінде және адъювантты индукцияланған артритте қабынуға қарсы белсенділікті көрсетті.Таншинон I-нің қабынуға қарсы белсенділігін анықтау үшін өткір және созылмалы қабынудың классикалық жануарлар үлгілері [егеуқұйрық каррагенаны (CGN) – индукцияланған табан ісінуі және егеуқұйрықтың адъювантты индукцияланған артриті (AIA)] пайдаланылды.Ауызша таншинон I қабылдағанда, ол CGN индукцияланған табан ісінуіне қарсы айтарлықтай қабынуға қарсы белсенділікті көрсетті (160 мг / кг-да 47% тежелу), ал индометациннің IC50 7,1 мг / кг болды.AIA-да таншинон I 18-ші күні ішке 50 мг/кг/тәу дозада қайталама қабынуды 27% тежеуді берді, ал преднизолон (5 мг/кг/тәу) тиімді тежелуді көрсетті (65%) [1]

Киназа эксперименті:PLA2 көзі ретінде адамның рекомбинантты sPLA2 (IIA түрі) PLA2 генімен трансфекцияланған CHO жасушаларынан тазартылды және оның бакуловирустағы экспрессиясы арқылы қоянның рекомбинантты тромбоциттері cPLA2 алынды.Стандартты реакция қоспасы (200) μ 50) Оның құрамында 100 мм Tris HCl буфері (рН 9,0), 6 мМ CaCl2 және 20 нмоль 1-ацил - [1-14C] - арахидонил Sn глицерин фосфат этаноламин (2000 CPM/n) болды.Немесе таншинон I жоқ. реакция 50NG тазартылған sPLA2 немесе cPLA2 қосу арқылы басталды.37 ° C температурада 20 минуттан кейін өндірілген бос май қышқылдары талданды.Осы стандартты жағдайларда 10%-ға жуық бос май қышқылдары таншинон I жоқ реакциялық қоспадағы қосылған фосфолипидті субстраттан бөлінеді [1].

Жасуша эксперименті:шикі 264,7 жасуша 5% СО2 астында 37 ℃ температурада 10% FBS және 1% антибиотиктермен толықтырылған DMEM көмегімен өсірілді.Қысқаша айтқанда, жасушалар 96 ұңғыма тақталарына (2) × 10 (5 ұяшық / ұңғыма) себілді.Егер басқаша көрсетілмесе, LPS (1г/мл) және таншинон I қосылды және 24 сағат бойы инкубацияланды.Ортадағы PGE2 концентрациясы PGE2 үшін EIA жинағы арқылы өлшенді.COX-2 индукциясынан кейін PGE 2 өндірісіне таншинон I әсерін анықтау үшін жасушалар 24 сағат бойы LPS (1 мк Г / мл) араластырылды және мұқият жуылды.Содан кейін таншинон I LPSсіз қосылды және жасушалар тағы 24 сағат бойы өсірілді.PGE2 концентрациясы ортадан өлшенді.MTT талдауы шикі жасушаларда таншинон I цитотоксикалықтығын зерттеу үшін қолданылды.Таншинон I 100 μ M кезінде ешқандай цитотоксикалық әсер көрсетпеді [1].

Жануарлар тәжірибесі:Жануарлардың жедел және созылмалы қабыну үлгілерінде таншинон I тежегіш белсенділігін бағалау үшін егеуқұйрық карагенаны (CGN) – индукцияланған табан ісінуі және адъювантты индукцияланған артрит (AIA) үлгілері қолданылды.Қысқаша айтқанда, пирогенсіз физиологиялық ерітіндіде (0,05 мл) ерітілген 1% CGN табан ісінуін тексеру үшін егеуқұйрықтардың оң жақ артқы табанына енгізілді.5 сағаттан кейін өңделген тырнақтардың ісінуі плетисмограф көмегімен өлшенді.0,5% CMC ерітілген таншинон I CGN инъекциясынан 1 сағат бұрын ауызша енгізілді.AIA сынағы үшін егеуқұйрықтардың оң жақ артқы табанына минералды майда ерітілген Mycobacterium lactis (0,6 мл/егеуқұйрық) инъекциясы арқылы артрит қабынуы туындады.Таншинон Мен күн сайын ауызша енгізілді.Өңделген және өңделмеген тырнақтардың кеңеюі плетисмограф көмегімен өлшенді.

Анықтамалар:[1] Kim SY, т.б.Salvia miltiorrhiza bunge-ден бөлінген Таншинон I-нің арахидон қышқылының метаболизміне және in vivo қабыну реакцияларына әсері.Phytother Res.2002 жылдың қарашасы;16(7):616-20.