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설명:tanshinone I은 IC50이 각각 11μM 및 82μM인 유형 IIA 인간 재조합 sPLA2 및 토끼 재조합 cPLA2 억제제입니다.

관련 카테고리:신호 경로 >> 대사 효소 /
프로테아제 >> 인지질
연구분야 > > 심혈관질환
천연물 > > 퀴논

표적:IC50: 11μM(sPLA2), 82μM(cPLA2)[1].

체외 연구:tanshinone I은 LPS로 유도된 원시 대식세포에 의한 PGE2의 형성을 억제했습니다(IC50 = 38μM). tanshinone I과 LPS를 동시에 첨가했을 때, 화합물은 M의 10-100μ PGE2 생산을 유의하게 억제했습니다(IC50 = 38μM )。 COX-2의 완전한 유도 후에 첨가될 때, 탄시논 I은 또한 PGE2의 생성을 감소시켰다(IC50 = 46 μM). 탄시논 I이 사전 유도된 COX-2를 통해 PGE 2 생성을 억제한다는 사실은 화합물이 COX-2 활성을 직접 억제하고/하거나 PLA2 활성에 영향을 미칩니다.탄시논 I을 2가지 다른 형태의 포스포리파제 A2(PLA2)와 함께 배양했을 때, 농도 의존적 ​​방식으로 sPLA2를 유의하게 억제했습니다(IC50 = 11) μM). 효능, tanshinone I도 cPLA2 억제(IC50 = 82) μM)[1]

생체 내 연구:tanshinone I은 쥐에서 carrageenan으로 유발된 발 부종과 보조제로 유발된 관절염에서 항염증 활성을 보였습니다.탄시논 I의 항염증 활성을 확립하기 위해 급성 및 만성 염증[쥐 카라기난(CGN)-유도 발 부종 및 쥐 보조제 유도 관절염(AIA)]의 고전적인 동물 모델을 사용했습니다.탄시논 I을 경구 투여했을 때 CGN 유발 발 부종에 대해 유의한 항염증 활성을 보인 반면(160mg/kg에서 47% 억제) 인도메타신의 IC50은 7.1mg/kg이었다.AIA에서 tanshinone I은 50mg/kg/day의 경구 용량에서 18일째 27%의 이차 염증 억제를 제공한 반면, prednisolone(5mg/kg/day)은 효과적인 억제(65%)를 나타냈습니다[1]

키나제 실험:PLA2의 소스로서 인간 재조합 sPLA2(type IIA)는 PLA2 유전자로 형질감염된 CHO 세포로부터 정제되었고, 토끼 재조합 혈소판 cPLA2는 baculovirus에서의 발현을 통해 얻어졌다.표준 반응 혼합물(200) μ 50) 100 mm Tris HCl 완충액(pH 9.0), 6 mM CaCl2 및 20 nmol의 1-아실-[1-14C]-아라키도닐 Sn 글리세롤 포스페이트 에탄올아민(2000 CPM/nmol)을 함유하였다.또는 tanshinone I이 없었습니다. 50NG 정제된 sPLA2 또는 cPLA2를 첨가하여 반응을 시작했습니다.37℃에서 20분 후, 생성된 유리지방산을 분석하였다.이러한 표준 조건에서 tanshinone I이 없는 반응 혼합물에서 약 10%의 유리 지방산이 추가된 인지질 기질에서 방출됩니다[1].

세포 실험:raw 264.7 세포는 5% CO2하에서 37℃에서 10% FBS 및 1% 항생제가 보충된 DMEM과 함께 배양되었습니다.요컨대, 세포를 96웰 플레이트(2) × 10(5개 세포/웰)에 접종했습니다.달리 명시되지 않는 한, LPS(1ug/ml) 및 탄시논 I을 첨가하고 24시간 동안 인큐베이션하였다.배지 내 PGE2 농도는 PGE2용 EIA 키트를 사용하여 측정되었습니다.COX-2 유도 후 PGE 2 생성에 대한 탄시논 I의 영향을 확인하기 위해 세포를 LPS(1μG/ml)와 24시간 동안 혼합하고 철저히 세척하였다.그런 다음 LPS 없이 tanshinone I을 첨가하고 다시 24시간 동안 세포를 배양하였다.배지로부터 PGE2 농도를 측정하였다.MTT 분석을 사용하여 원시 세포에 대한 탄시논 I의 세포독성을 조사했습니다.100 μM에서 Tanshinone I은 어떤 세포독성도 나타내지 않았습니다[1].

동물 실험:급성 및 만성 염증 동물 모델에서 탄시논 I의 억제 활성을 평가하기 위해 쥐 카라기난(CGN) 유발 발 부종 및 보조제 유발 관절염(AIA) 모델을 사용했습니다.간단히 말해서, 발 부종 테스트를 위해 1% CGN을 발열원 없는 식염수(0.05ml)에 녹인 쥐의 오른쪽 뒷발에 주사했습니다.5시간 후 혈량계를 이용하여 처리된 발톱의 부종을 측정하였다.0.5% CMC에 녹인 탄시논 I을 CGN 주사 1시간 전에 경구 투여하였다.AIA 테스트를 위해 미네랄 오일에 녹인 Mycobacterium lactis(0.6ml/rat)를 쥐의 오른쪽 뒷발에 주사하여 관절염 염증을 유도하였다.탄시논은 매일 경구 투여했습니다.처리된 발톱과 처리되지 않은 발톱의 팽창을 혈량계를 사용하여 측정했습니다.

참조:[1] Kim SY, et al.salvia miltiorrhiza bunge에서 분리한 Tanshinone I이 아라키돈산 대사 및 생체 내 염증 반응에 미치는 영향.Phytother 해상도2002년 11월;16(7):616-20.