Продукциялар

Description:tanshinone I түрү IIA адам рекомбинантты sPLA2 жана Rabbit рекомбинант cPLA2 ингибитору IC50 11 тиешелүүлүгүнө жараша μ M жана 82 μ M。

Тектеш категориялар:сигнал жолдору > > метаболикалык ферменттер /
протеаздар > > фосфолипиддер
Изилдөө багыты > > жүрөк-кан тамыр оорулары
Табигый продуктулар > > Хинондор

Максат:IC50: 11 мкм (sPLA2), 82 мкм (cPLA2)[1].

In Vitro изилдөө:tanshinone I LPS индукцияланган чийки макрофагдар тарабынан PGE2 түзүлүшүнө тоскоол болгон (IC50 = 38 μ M）。 Таншинон I жана LPS бир эле учурда кошулганда, кошулма M (IC50 = 38 μ M) 10-100 μ PGE2 өндүрүшүн олуттуу түрдө токтоткон. ）。 COX-2 толук индукциялангандан кийин кошулганда, таншинон I ошондой эле PGE2 (IC50 = 46) μ M өндүрүшүн азайтты. Таншинон I алдын ала индукцияланган COX-2 аркылуу PGE 2 өндүрүшүн бөгөттөгөн факты кошулма түздөн-түз COX-2 активдүүлүгүн ингибирлейт жана/же PLA2 активдүүлүгүнө таасир этет.. Таншинон I фосфолипазанын A2 (PLA2) эки түрдүү формасы менен инкубацияланганда, ал концентрацияга көз каранды (IC50 = 11) μ M) менен sPLA2ди олуттуу түрдө бөгөттөгөн. потенциал, таншинон I ошондой эле cPLA2 (IC50 = 82) μ M） [1]

In Vivo изилдөө:таншинон Мен келемиштерде карагенан менен шартталган лапанын шишигинде жана адъювант менен коштолгон артритте сезгенүүгө каршы активдүүлүктү көрсөттү.Таншинон Iнин сезгенүүгө каршы активдүүлүгүн белгилөө үчүн курч жана өнөкөт сезгенүүнүн классикалык жаныбарлар моделдери [келемиш каррагенан (CGN) - индукцияланган лапанын шишиги жана келемиштердин адъюванты менен коштолгон артрит (AIA)] колдонулган.Качан оозеки таншинон I, ал CGN менен шартталган лапанын шишигине каршы олуттуу сезгенүүгө каршы активдүүлүгүн көрсөттү (160 мг/кг 47% бөгөт), ал эми индометациндин IC50 7,1 мг/кг болгон.AIAда таншинон I 18-күнү 50 мг/кг/сутка пероралдык дозада экинчилик сезгенүүнү 27% тежеген, ал эми преднизолон (5 мг/кг/күн) эффективдүү бөгөт койгон (65%) [1]

Kinase эксперименти:PLA2 булагы катары адамдын рекомбинанты sPLA2 (IIA түрү) PLA2 гени менен трансфекцияланган CHO клеткаларынан тазаланып, анын бакуловируста экспрессиясы аркылуу коёндун рекомбинантты тромбоцити cPLA2 алынган.Стандарттык реакция аралашмасы (200) μ 50) Анын курамында 100 мм Tris HCl буфери (рН 9,0), 6 мМ CaCl2 жана 20 нмоль 1-ацил - [1-14С] - арахидонил Sn глицерол фосфат этаноламин (2000 CPM/n) бар.Же таншинон I жок эле. реакция 50NG тазаланган sPLA2 же cPLA2 кошуу менен башталган.37 ℃ 20 мүнөттөн кийин, өндүрүлгөн эркин май кислоталары талдоого алынган.Бул стандарттык шарттарда 10%ке жакын эркин май кислоталары таншинон Iсиз реакциялык аралашмада кошулган фосфолипиддик субстраттан бөлүнүп чыгат [1].

Клетка эксперименти:чийки 264,7 клетка 10% FBS жана 1% антибиотиктер менен толукталган DMEM менен 37 ℃ 5% CO2 астында өстүрүлгөн.Кыскача айтканда, клеткалар 96 кудук пластинкаларына себилген (2) × 10 (5 клетка / кудук).Эгерде башкасы көрсөтүлбөсө, LPS (1г/мл) жана таншинон I кошулуп, 24 саат бою инкубацияланды.чөйрөдөгү PGE2 концентрациясы PGE2 үчүн EIA комплектинин жардамы менен өлчөнгөн.COX-2 индукциясынан кийин PGE 2 өндүрүшүнө таншинон I таасирин аныктоо үчүн, клеткалар 24 саат бою LPS (1 мк Г / мл) менен аралаштырылды жана кылдат жуулду.Андан кийин, таншинон I LPSсиз кошулду жана клеткалар дагы 24 саат бою өстүрүлдү.PGE2 концентрациясы чөйрөдөн ченелген.MTT анализи чийки клеткаларда таншинон Iнин цитотоксичтүүлүгүн изилдөө үчүн колдонулган.100 μ M Таншинон I эч кандай цитотоксиктикти көрсөткөн эмес [1].

Жаныбарлар эксперименти:курч жана өнөкөт сезгенүү жаныбарлар моделдеринде таншинон I ингибитордук активдүүлүгүн баалоо үчүн келемиш карагенаны (CGN) - индукцияланган лапанын шишиги жана адъюванттык индукцияланган артрит (AIA) моделдери колдонулган.Кыскача айтканда, пирогенсиз тузда эриген 1% CGN (0,05 мл) чычкандардын оң арткы таманына бутунун шишигин текшерүү үчүн сайылган.5 сааттан кийин иштетилген тырмактардын шишиги плетисмографтын жардамы менен өлчөнөт.Таншинон I 0,5% CMC менен эриген CGN инъекциядан 1 саат мурун оозеки кабыл алынган.AIA тести үчүн минералдык майга эриген Mycobacterium lactis (0,6 мл / келемиш) келемиштердин арткы оң бутуна сайып, артриттин сезгенүүсү пайда болгон.Tanshinone Мен күн сайын оозеки кабыл алынган.Дарыланган жана тазаланбаган тырмактардын кеңейүүсү плетисмограф аркылуу өлчөнгөн.

Шилтемелер:[1] Kim SY, et al.Salvia miltiorrhiza bungeден бөлүнүп алынган Таншинон Iнин арахидон кислотасынын метаболизмине жана in vivo сезгенүү реакцияларына тийгизген таасири.Phytother Res.2002-ж.16(7):616-20.