Produktai

Apibūdinimas:tanšinonas I yra IIA tipo žmogaus rekombinantinis sPLA2 ir triušio rekombinantinis cPLA2 inhibitorius, kurio IC50 yra atitinkamai 11 μM ir 82 μM.

Susijusios kategorijos:signalizacijos keliai >> metaboliniai fermentai /
proteazės > > fosfolipidai
Tyrimo sritis > > širdies ir kraujagyslių ligos
Natūralūs produktai >> Chinonai

Tikslas:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro tyrimas:tanšinonas I slopino PGE2 susidarymą LPS sukeltų neapdorotų makrofagų (IC50 = 38 μM）。 Kai tanshinonas I ir LPS buvo dedami tuo pačiu metu, junginys reikšmingai slopino 10-100 μ PGE2 M gamybą (IC50 = 38 μM). ）。 Įdėjus po visiško COX-2 indukcijos, tanshinonas I taip pat sumažino PGE2 gamybą (IC50 = 46) μM）。 Tai, kad tanshinonas I slopina PGE 2 gamybą per iš anksto sukeltą COX-2, aiškiai rodo, kad junginys gali tiesiogiai slopina COX-2 aktyvumą ir (arba) veikia PLA2 aktyvumą. Kai tanshinonas I buvo inkubuojamas su dviem skirtingomis fosfolipazės A2 (PLA2) formomis, jis reikšmingai slopino sPLA2 priklausomai nuo koncentracijos (IC50 = 11) μM. Nepaisant mažo jo kiekio stiprumas, tanshinonas I taip pat slopino cPLA2 (IC50 = 82) μM）[1]

In vivo tyrimas:Tanšinonas I parodė priešuždegiminį aktyvumą gydant karagenino sukeltą letenų edemą ir adjuvanto sukeltą artritą žiurkėms.Tanšinono I priešuždegiminiam aktyvumui nustatyti buvo naudojami klasikiniai ūminio ir lėtinio uždegimo gyvūnų modeliai [žiurkės karagenino (CGN) sukelta letenų edema ir žiurkės adjuvanto sukeltas artritas (AIA)].Geriant tanshinoną I, jis parodė didelį priešuždegiminį aktyvumą prieš CGN sukeltą letenų edemą (47% slopinimas esant 160 mg / kg), o indometacino IC50 buvo 7,1 mg / kg.Sergant AIA, tanshinonas I 27 % slopino antrinį uždegimą 18 dieną vartodamas 50 mg/kg per parą per burną, o prednizolonas (5 mg/kg per parą) veiksmingai slopino (65 %) [1]

Kinazės eksperimentas:Kaip PLA2 šaltinis, žmogaus rekombinantinis sPLA2 (IIA tipas) buvo išgrynintas iš CHO ląstelių, transfekuotų PLA2 genu, ir triušio rekombinantinis trombocitas cPLA2 buvo gautas per jo ekspresiją bakuloviruse.Standartinis reakcijos mišinys (200) μ 50) Jame buvo 100 mm Tris HCl buferio (pH 9,0), 6 mM CaCl2 ir 20 nmol 1-acil - [1-14C] - arachidonil Sn glicerolio fosfato etanolamino (2000 nmol CPM).Arba nebuvo tanshinono I. reakcija buvo pradėta pridedant 50NG išgryninto sPLA2 arba cPLA2.Po 20 minučių 37 ℃ temperatūroje buvo analizuojamos susidariusios laisvosios riebalų rūgštys.Esant tokioms standartinėms sąlygoms, apie 10% laisvųjų riebalų rūgščių išsiskiria iš pridėto fosfolipidinio substrato reakcijos mišinyje be tanshinono I [1].

Ląstelių eksperimentas:neapdorotos 264,7 ląstelės buvo kultivuojamos su DMEM, papildytu 10% FBS ir 1% antibiotikų 37 ℃ temperatūroje, esant 5% CO2.Trumpai tariant, ląstelės buvo pasėtos į 96 šulinėlių plokšteles (2) × 10 (5 ląstelės / šulinėlis).Jei nenurodyta kitaip, buvo pridėta LPS (1 ug/ml) ir tanšinono I ir inkubuojami 24 valandas.PGE2 koncentracija terpėje buvo matuojama naudojant PGE2 PGE2 rinkinį.Siekiant nustatyti tanšinono I poveikį PGE 2 gamybai po COX-2 indukcijos, ląstelės 24 valandas buvo maišomos su LPS (1 μG / ml) ir kruopščiai nuplaunamos.Tada buvo pridėtas tanshinonas I be LPS ir ląstelės buvo kultivuojamos dar 24 valandas.PGE2 koncentracija buvo matuojama iš terpės.MTT tyrimas buvo naudojamas tiriant tanšinono I citotoksiškumą neapdorotose ląstelėse.100 μM tanšinonas I neparodė jokio citotoksiškumo [1].

Eksperimentas su gyvūnais:Siekiant įvertinti tanšinono I slopinamąjį aktyvumą ūminių ir lėtinių uždegiminių gyvūnų modeliuose, buvo naudojami žiurkės karagenino (CGN) sukeltos letenos edemos ir adjuvanto sukelto artrito (AIA) modeliai.Trumpai tariant, 1% CGN, ištirpinto fiziologiniame tirpale be pirogeno (0,05 ml), buvo įšvirkščiama į dešinę užpakalinę žiurkių leteną, kad būtų atliktas letenų edemos tyrimas.Po 5 valandų pletizmografu išmatuotas gydytų nagų patinimas.Tanšinonas I, ištirpintas 0, 5% CMC, buvo vartojamas per burną 1 valandą prieš CGN injekciją.AIA testui artritinis uždegimas buvo sukeltas į dešinę užpakalinę žiurkės leteną suleidus mineraliniame aliejuje ištirpinto Mycobacterium lactis (0,6 ml / žiurkei).Tanshinone man buvo skiriamas per burną kiekvieną dieną.Apdorotų ir neapdorotų nagų išsiplėtimas buvo matuojamas pletizmografu.

Nuorodos:[1] Kim SY ir kt.Iš Salvia miltiorrhiza bunge išskirto Tanshinone I poveikis arachidono rūgšties metabolizmui ir in vivo uždegiminiams atsakams.Phytother Res.2002 lapkritis;16(7):616-20.