Produk

Penerangan:tanshinone I ialah rekombinan manusia jenis IIA sPLA2 dan perencat cPLA2 Rekombinan Arnab dengan IC50 masing-masing 11 μ M dan 82 μ M。

Kategori Berkaitan:laluan isyarat > > enzim metabolik /
protease > > fosfolipid
Bidang penyelidikan > > penyakit kardiovaskular
Produk Semulajadi > > Quinones

Sasaran:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Kajian In Vitro:tanshinone I menghalang pembentukan PGE2 oleh makrofaj mentah yang disebabkan oleh LPS (IC50 = 38 μ M）。 Apabila tanshinone I dan LPS ditambah pada masa yang sama, sebatian itu menghalang pengeluaran 10-100 μ PGE2 M dengan ketara (IC50 = 38 μ M ）。 Apabila ditambah selepas aruhan lengkap COX-2, tanshinone I juga mengurangkan pengeluaran PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 Fakta bahawa tanshinone I menghalang pengeluaran PGE 2 melalui COX-2 pra teraruh sangat menunjukkan bahawa sebatian itu boleh secara langsung menghalang aktiviti COX-2 dan / atau menjejaskan Aktiviti PLA2. Apabila tanshinone saya diinkubasi dengan dua bentuk fosfolipase A2 (PLA2) yang berbeza, ia menghalang sPLA2 dengan ketara dalam cara bergantung kepekatan (IC50 = 11) μ M). Walaupun rendah potensi, tanshinone I juga menghalang cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Kajian Dalam Vivo:tanshinone I menunjukkan aktiviti anti-radang dalam edema kaki akibat karagenan dan arthritis akibat adjuvant pada tikus.Untuk mewujudkan aktiviti anti-radang tanshinone I, model haiwan klasik keradangan akut dan kronik [karagenan tikus (CGN) - edema kaki akibat dan arthritis akibat adjuvant tikus (AIA)] telah digunakan.Apabila tanshinone oral I, ia menunjukkan aktiviti anti-radang yang ketara terhadap edema kaki yang disebabkan oleh CGN (perencatan 47% pada 160 mg / kg), manakala IC50 indometasin ialah 7.1 mg / kg.Di AIA, tanshinone I memberikan 27% perencatan keradangan sekunder pada hari ke-18 pada dos oral 50 mg / kg / hari, manakala prednisolone (5 mg / kg / hari) menunjukkan perencatan yang berkesan (65%) [1]

Eksperimen Kinase:sebagai sumber PLA2, sPLA2 rekombinan manusia (jenis IIA) telah disucikan daripada sel CHO yang ditransfeksi dengan gen PLA2, dan platelet rekombinan arnab cPLA2 diperoleh melalui ekspresinya dalam baculovirus.Campuran tindak balas piawai (200) μ 50) Ia mengandungi penimbal Tris HCl 100 mm (pH 9.0), 6 mM CaCl2 dan 20 nmol 1-asil - [1-14C] - arachidonyl Sn gliserol fosfat etanolamin (2000 CPM / nmol).Atau tiada tanshinone I. tindak balas dimulakan dengan menambah 50NG sPLA2 atau cPLA2 yang dimurnikan.Selepas 20 minit pada suhu 37 ℃, asid lemak bebas yang dihasilkan dianalisis.Di bawah keadaan piawai ini, kira-kira 10% asid lemak bebas dibebaskan daripada substrat fosfolipid tambahan dalam campuran tindak balas tanpa tanshinone I [1].

Eksperimen Sel:264.7 sel mentah telah dikultur dengan DMEM ditambah dengan 10% FBS dan 1% antibiotik pada 37 ℃ di bawah 5% CO2.Ringkasnya, sel telah disemai pada 96 plat telaga (2) × 10 (5 sel / telaga).Melainkan dinyatakan sebaliknya, LPS (1ug / ml) dan tanshinone I ditambah dan diinkubasi selama 24 jam.Kepekatan PGE2 dalam medium diukur menggunakan kit EIA untuk PGE2.Untuk menentukan kesan tanshinone I pada pengeluaran PGE 2 selepas induksi COX-2, sel dicampur dengan LPS (1 μ G / ml) selama 24 jam dan dibasuh dengan teliti.Kemudian, tanshinone I ditambah tanpa LPS dan sel dibiakkan selama 24 jam lagi.Kepekatan PGE2 diukur dari medium.Ujian MTT digunakan untuk mengkaji sitotoksisiti tanshinone I pada sel mentah.Tanshinone I pada 100 μ M tidak menunjukkan sebarang sitotoksisiti [1].

Eksperimen Haiwan:untuk menilai aktiviti perencatan tanshinone I pada model haiwan radang akut dan kronik, model karagenan tikus (CGN) - edema kaki yang disebabkan oleh adjuvant dan arthritis akibat adjuvant (AIA) telah digunakan.Ringkasnya, 1% CGN terlarut dalam garam bebas pirogen (0.05 ml) telah disuntik ke dalam kaki belakang kanan tikus untuk ujian edema kaki.Selepas 5 jam, bengkak kuku yang dirawat diukur menggunakan plethysmograph.Tanshinone I yang dilarutkan dalam 0.5% CMC ditadbir secara lisan 1 jam sebelum suntikan CGN.Untuk ujian AIA, keradangan artritis dicetuskan dengan menyuntik Mycobacterium lactis (0.6ml / tikus) yang dilarutkan dalam minyak mineral ke dalam kaki belakang kanan tikus.Tanshinone saya diberikan secara lisan setiap hari.Pengembangan kuku yang dirawat dan tidak dirawat diukur menggunakan plethysmograph.

Rujukan:[1] Kim SY, et al.Kesan Tanshinone I yang diasingkan daripada Salvia miltiorrhiza bunge pada metabolisme asid arakidonik dan tindak balas keradangan in vivo.Phytother Res.2002 Nov;16(7):616-20.