Produse

Descriere:tanshinone I este un sPLA2 recombinant uman de tip IIA și un inhibitor de cPLA2 recombinant de iepure cu IC50 de 11 μM și respectiv 82 μM.

Categorii relevante:căi de semnalizare > > enzime metabolice /
proteaze > > fosfolipide
Domeniul de cercetare > > boli cardiovasculare
Produse naturale > > Chinone

Ţintă:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Studiu in vitro:tanshinona I a inhibat formarea PGE2 de către macrofagele brute induse de LPS (IC50 = 38 μ M）。 Când s-au adăugat tanshinone I și LPS în același timp, compusul a inhibat semnificativ producția de 10-100 μ PGE2 de M (IC50 = 38 μ M). ）。 Când este adăugată după inducerea completă a COX-2, tanshinona I a redus, de asemenea, producția de PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 Faptul că tanshinona I inhibă producția de PGE 2 prin COX-2 pre-indus sugerează puternic că compusul poate inhibă direct activitatea COX-2 și/sau afectează activitatea PLA2 Când tanshinona I a fost incubată cu două forme diferite de fosfolipază A2 (PLA2), a inhibat semnificativ sPLA2 într-o manieră dependentă de concentrație (IC50 = 11) μ M). potența, tanshinona I a inhibat și cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Studiu in vivo:tanshinona I a arătat activitate antiinflamatoare în edemul labei indus de caragenan și artrita indusă de adjuvant la șobolani.Pentru a stabili activitatea antiinflamatoare a tanshinonei I, au fost utilizate modele animale clasice de inflamație acută și cronică [caragenanul de șobolan (CGN) - edem indus de labe și artrita indusă de adjuvant de șobolan (AIA)].Când tanshinona I orală, a arătat o activitate antiinflamatoare semnificativă împotriva edemului labei indus de CGN (47% inhibare la 160 mg/kg), în timp ce IC50 al indometacinei a fost de 7,1 mg/kg.În AIA, tanshinona I a inhibat 27% a inflamației secundare în ziua 18 la o doză orală de 50 mg/kg/zi, în timp ce prednisolonul (5 mg/kg/zi) a prezentat o inhibare eficientă (65%) [1]

Experimentul kinazei:ca sursă de PLA2, sPLA2 recombinat uman (tip IIA) a fost purificat din celule CHO transfectate cu gena PLA2, iar cPLA2 recombinat de trombocite de iepure a fost obţinut prin exprimarea sa în baculovirus.Amestecul de reacție standard (200) μ 50) A conținut 100 mm tampon Tris HCl (pH 9,0), 6 mM CaCl2 și 20 nmol de 1-acil - [1-14C] - arahidonil Sn glicerol fosfat etanolamină (2000 CPM/nmol).Sau nu a existat tanshinonă I. reacția a fost începută prin adăugarea de 50NG sPLA2 sau cPLA2 purificat.După 20 de minute la 37 ℃, au fost analizați acizii grași liberi produși.În aceste condiții standard, aproximativ 10% din acizii grași liberi sunt eliberați din substratul fosfolipidic adăugat în amestecul de reacție fără tanshinona I [1].

Experimentul celular:264,7 celule brute au fost cultivate cu DMEM suplimentat cu 10% FBS și 1% antibiotice la 37 ℃ sub 5% CO2.Pe scurt, celulele au fost însămânțate pe plăci cu 96 de godeuri (2) × 10 (5 celule / godeu).Dacă nu se indică altfel, LPS (1 ug/ml) și tanshinona I au fost adăugate și incubate timp de 24 de ore.Concentrația de PGE2 în mediu a fost măsurată folosind kitul EIA pentru PGE2.Pentru a determina efectul tanshinonei I asupra producției de PGE 2 după inducerea COX-2, celulele au fost amestecate cu LPS (1 μ G / ml) timp de 24 de ore și spălate bine.Apoi, tanshinona I a fost adăugată fără LPS și celulele au fost cultivate pentru încă 24 de ore.Concentrația PGE2 a fost măsurată din mediu.Testul MTT a fost utilizat pentru a examina citotoxicitatea tanshinonei I pe celulele brute.Tanshinona I la 100 μM nu a prezentat nicio citotoxicitate [1].

Experiment cu animale:pentru a evalua activitatea inhibitoare a tanshinonei I pe modele animale inflamatorii acute și cronice, au fost utilizate modele de edem indus de labe de șobolan caragenan (CGN) și artrită indusă adjuvant (AIA).Pe scurt, 1% CGN dizolvat în soluție salină apirogenă (0,05 ml) a fost injectat în laba spate dreaptă a șobolanilor pentru testul edemului labei.După 5 ore, umflarea ghearelor tratate a fost măsurată folosind un pletismograf.Tanshinone I dizolvat în 0,5% CMC a fost administrat oral cu 1 oră înainte de injectarea CGN.Pentru testul AIA, inflamația artritică a fost indusă prin injectarea Mycobacterium lactis (0,6 ml/șobolan) dizolvat în ulei mineral în laba din spate dreaptă a șobolanilor.Tanshinone mi-a fost administrat pe cale orală în fiecare zi.Expansiunea ghearelor tratate și netratate a fost măsurată folosind un pletismograf.

Referinte:[1] Kim SY, et al.Efectele Tanshinonei I izolate din Salvia miltiorrhiza bunge asupra metabolismului acidului arahidonic și a răspunsurilor inflamatorii in vivo.Phytother Res.2002 noiembrie;16(7):616-20.