Товары

Описание:таншинон I представляет собой ингибитор рекомбинантной sPLA2 человека типа IIA и рекомбинантной cPLA2 кролика с IC50 11 мкМ и 82 мкМ соответственно.

Связанные категории:сигнальные пути > > метаболические ферменты /
протеазы > > фосфолипиды
Область исследования > > сердечно-сосудистые заболевания
Натуральные продукты > > Хиноны

Цель:IC50: 11 мкМ (сФЛА2), 82 мкМ (цФЛА2)[1].

Исследование in vitro:таншинон I ингибировал образование PGE2 необработанными макрофагами, индуцированными ЛПС (IC50 = 38 мкМ). ）。 При добавлении после полной индукции ЦОГ-2 таншинон I также снижал выработку PGE2 (IC50 = 46) мкМ). непосредственно ингибируют активность ЦОГ-2 и/или влияют на активность PLA2. Когда таншинон I инкубировали с двумя различными формами фосфолипазы A2 (PLA2), он значительно ингибировал sPLA2 зависимым от концентрации образом (IC50 = 11) мкМ). эффективность, таншинон I также ингибировал cPLA2 (IC50 = 82) мкМ)[1]

Исследование in vivo:таншинон I показал противовоспалительную активность при каррагинан-индуцированном отеке лапы и индуцированном адъювантом артрите у крыс.Чтобы установить противовоспалительную активность таншинона I, использовали классические животные модели острого и хронического воспаления [отек лапы, индуцированный каррагинаном (CGN), и артрит, индуцированный адъювантом крысы (AIA)].При пероральном приеме таншинона I он проявлял значительную противовоспалительную активность в отношении индуцированного ХГН отека лапы (47% ингибирование при 160 мг/кг), в то время как IC50 индометацина составляла 7,1 мг/кг.При АИА таншинон I давал 27% ингибирование вторичного воспаления на 18-й день при пероральном приеме в дозе 50 мг/кг/сут, в то время как преднизолон (5 мг/кг/сут) продемонстрировал эффективное ингибирование (65%) [1].

Эксперимент с киназой:В качестве источника PLA2 рекомбинантная sPLA2 человека (тип IIA) была очищена из клеток CHO, трансфицированных геном PLA2, а рекомбинантная cPLA2 тромбоцитов кролика была получена посредством ее экспрессии в бакуловирусе.Стандартная реакционная смесь (200) мкл 50). Она содержала 100 мМ трис-HCl-буфера (pH 9,0), 6 мМ CaCl2 и 20 нмоль 1-ацил-[1-14C]-арахидонилSn глицеролфосфатэтаноламина (2000 имп/мин/нмоль).Или не было таншинона I. Реакцию запускали добавлением 50NG очищенного sPLA2 или cPLA2.Через 20 минут при 37 ℃ были проанализированы образовавшиеся свободные жирные кислоты.В этих стандартных условиях из добавленного фосфолипидного субстрата в реакционную смесь без таншинона I высвобождается около 10% свободных жирных кислот [1].

Клеточный эксперимент:необработанные клетки 264.7 культивировали в среде DMEM с добавлением 10% FBS и 1% антибиотиков при 37°С и 5% CO2.Вкратце, клетки высевали на 96-луночные планшеты (2)×10 (5 клеток/лунку).Если не указано иное, добавляли LPS (1 мкг/мл) и таншинон I и инкубировали в течение 24 часов.Концентрацию ПГЕ2 в среде измеряли с помощью набора ИФА для ПГЕ2.Чтобы определить влияние таншинона I на продукцию PGE 2 после индукции ЦОГ-2, клетки смешивали с LPS (1 мкг/мл) в течение 24 часов и тщательно промывали.Затем добавляли таншинон I без ЛПС и клетки культивировали еще 24 часа.Концентрацию PGE2 измеряли в среде.Анализ МТТ использовали для изучения цитотоксичности таншинона I на необработанных клетках.Таншинон I в концентрации 100 мкМ не проявлял цитотоксичности [1].

Эксперимент на животных:для оценки ингибирующей активности таншинона I на моделях животных с острым и хроническим воспалением использовали модели крысиного каррагинана (CGN), индуцированного отеком лапы, и модели артрита, индуцированного адъювантом (AIA).Короче говоря, 1% CGN, растворенный в апирогенном солевом растворе (0,05 мл), вводили крысам в правую заднюю лапу для теста на отек лапы.Через 5 часов набухание обработанных когтей измеряли с помощью плетизмографа.Таншинон I, растворенный в 0,5% CMC, вводили перорально за 1 час до инъекции CGN.Для теста AIA артритное воспаление индуцировали путем инъекции Mycobacterium lactis (0,6 мл на крысу), растворенных в минеральном масле, в правую заднюю лапу крыс.Таншинон I вводили перорально каждый день.Расширение обработанных и необработанных копытец измеряли с помощью плетизмографа.

Использованная литература:[1] Ким С.Ю. и др.Влияние таншинона I, выделенного из Salvia miltiorrhiza bunge, на метаболизм арахидоновой кислоты и воспалительные реакции in vivo.Фитотер Рез.2002 ноябрь;16(7):616-20.