Produktet

Përshkrim:tanshinone I është një frenues sPLA2 rekombinant i njeriut të tipit IIA dhe cPLA2 rekombinant i lepurit me IC50 prej 11 μ M dhe 82 μ M.

Kategoritë e ngjashme:rrugët e sinjalizimit > > enzimat metabolike /
proteaza > > fosfolipide
Fusha e kërkimit > > sëmundjet kardiovaskulare
Produkte Natyrale > > Kinone

Synimi:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

Studimi In Vitro:tanshinoni I pengoi formimin e PGE2 nga makrofagët e papërpunuar të induktuar nga LPS (IC50 = 38 μ M）. Kur tanshinone I dhe LPS u shtuan në të njëjtën kohë, përbërja pengoi ndjeshëm prodhimin 10-100 μ PGE2 të M (IC50 = 38 μ M ）。 Kur shtohet pas induksionit të plotë të COX-2, tanshinoni I zvogëloi gjithashtu prodhimin e PGE2 (IC50 = 46) μ M）. Fakti që tanshinoni I pengon prodhimin e PGE 2 përmes COX-2 të induktuar paraprakisht sugjeron fuqimisht se përbërja mund të frenon drejtpërdrejt aktivitetin e COX-2 dhe/ose ndikon në aktivitetin e PLA2. Kur tanshinone I u inkubua me dy forma të ndryshme të fosfolipazës A2 (PLA2), ai frenoi ndjeshëm sPLA2 në një mënyrë të varur nga përqendrimi (IC50 = 11) μ M). fuqia, tanshinone I pengoi gjithashtu cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1]

Studimi In Vivo:tanshinone I tregoi aktivitet anti-inflamator në edemën e putrave të shkaktuar nga karragjenani dhe artritin e induktuar nga adjuvant tek minjtë.Për të vendosur aktivitetin anti-inflamator të tanshinone I, u përdorën modelet klasike të kafshëve të inflamacionit akut dhe kronik [edema e putrave të induktuar nga karragjenani (CGN) nga miu dhe artriti i induktuar nga adjuvant i miut (AIA)].Kur tanshinone I nga goja, ai tregoi një aktivitet të rëndësishëm anti-inflamator kundër edemës së putrave të shkaktuar nga CGN (frenim 47% në 160 mg / kg), ndërsa IC50 e indometacinës ishte 7.1 mg / kg.Në AIA, tanshinone I dha 27% frenim të inflamacionit sekondar në ditën e 18 në një dozë orale prej 50 mg / kg / ditë, ndërsa prednizoloni (5 mg / kg / ditë) tregoi frenim efektiv (65%) [1]

Eksperimenti i kinazës:si burim i PLA2, sPLA2 rekombinante e njeriut (tipi IIA) u pastrua nga qelizat CHO të transfektuara me gjenin PLA2 dhe trombocitet rekombinante cPLA2 të lepurit u përftuan nëpërmjet shprehjes së tij në bakulovirus.Përzierje standarde e reaksionit (200) μ 50) Ai përmbante 100 mm tampon Tris HCl (pH 9,0), 6 mM CaCl2 dhe 20 nmol 1-acil - [1-14C] - arakidonil Sn glicerinë fosfat etanolamine (2000mol CPM / n).Ose nuk kishte tanshinone I. reagimi filloi duke shtuar 50NG sPLA2 ose cPLA2 të pastruar.Pas 20 minutash në 37 ℃, u analizuan acidet yndyrore të lira të prodhuara.Në këto kushte standarde, rreth 10% e acideve yndyrore të lira çlirohen nga substrati fosfolipid i shtuar në përzierjen e reaksionit pa tanshinone I [1].

Eksperimenti i qelizave:264.7 qeliza të papërpunuara u kultivuan me DMEM të plotësuar me 10% FBS dhe 1% antibiotikë në 37 ℃ nën 5% CO2.Me pak fjalë, qelizat u mbollën në pllaka 96 pusesh (2) × 10 (5 qeliza / pus).Përveç nëse tregohet ndryshe, LPS (1ug/ml) dhe tanshinone I u shtuan dhe u inkubuan për 24 orë.Përqendrimi i PGE2 në mjedis u mat duke përdorur çantën EIA për PGE2.Për të përcaktuar efektin e tanshinone I në prodhimin e PGE 2 pas induksionit të COX-2, qelizat u përzien me LPS (1 μ G / ml) për 24 orë dhe u lanë plotësisht.Më pas, u shtua tanshinone I pa LPS dhe qelizat u kultivuan për 24 orë të tjera.Përqendrimi i PGE2 u mat nga mjedisi.Analiza MTT u përdor për të ekzaminuar citotoksicitetin e tanshinone I në qelizat e papërpunuara.Tanshinone I në 100 μ M nuk tregoi ndonjë citotoksicitet [1].

Eksperimenti me kafshë:për të vlerësuar aktivitetin frenues të tanshinone I në modelet e kafshëve inflamatore akute dhe kronike, u përdorën modelet e edemës së putrave të induktuar nga karragjenani (CGN) nga miu dhe modelet e artritit të induktuar nga adjuvant (AIA).Me pak fjalë, 1% CGN e tretur në kripë pa pirogjen (0.05 ml) u injektua në putrën e pasme të djathtë të minjve për testin e edemës së putrave.Pas 5 orësh, ënjtja e kthetrave të trajtuara u mat duke përdorur një pletismograf.Tanshinone I i tretur në 0.5% CMC u administrua nga goja 1 orë para injektimit të CGN.Për testin AIA, inflamacioni i artritit u shkaktua duke injektuar Mycobacterium lactis (0.6 ml / miu) të tretur në vaj mineral në putrën e pasme të djathtë të minjve.Tanshinone më jepej nga goja çdo ditë.Zgjerimi i kthetrave të trajtuara dhe të patrajtuara u mat duke përdorur një pletismograf.

Referencat:[1] Kim SY, et al.Efektet e Tanshinone I të izoluar nga Salvia miltiorrhiza bunge në metabolizmin e acidit arachidonic dhe përgjigjet in vivo inflamatore.Phytother Res.2002 nëntor;16 (7): 616-20.