Производи

Опис:таншинон И је тип ИИА хумани рекомбинантни сПЛА2 и зечји рекомбинантни цПЛА2 инхибитор са ИЦ50 од 11 μМ и 82 μМ.

Повезане категорије:сигнални путеви > > метаболички ензими /
протеазе > > фосфолипиди
Област истраживања > > кардиоваскуларне болести
Природни производи > > Кинони

Циљ:ИЦ50: 11 μМ (сПЛА2), 82 μМ (цПЛА2)[1].

Ин витро студија:таншинон И је инхибирао формирање ПГЕ2 од стране ЛПС индукованих сирових макрофага (ИЦ50 = 38 μМ)。 Када су таншинон И и ЛПС додани у исто време, једињење је значајно инхибирало производњу М од 10-100 μ ПГЕ2 (ИЦ50 = 38 μМ). ）。 Када се дода након потпуне индукције ЦОКС-2, таншинон И је такође смањио производњу ПГЕ2 (ИЦ50 = 46) μ М）。 Чињеница да таншинон И инхибира производњу ПГЕ 2 путем унапред индукованог ЦОКС-2 снажно сугерише да једињење може директно инхибирају активност ЦОКС-2 и/или утичу на активност ПЛА2. Када је таншинон И инкубиран са два различита облика фосфолипазе А2 (ПЛА2), значајно је инхибирао сПЛА2 на начин зависан од концентрације (ИЦ50 = 11) μМ). потенција, таншинон И је такође инхибирао цПЛА2 (ИЦ50 = 82) μ М）[1]

Ин виво студија:таншинон И показао је антиинфламаторну активност код едема шапе изазваног карагенаном и артритиса изазваног адјувансом код пацова.Да би се установила антиинфламаторна активност таншинона И, коришћени су класични животињски модели акутне и хроничне инфламације [едем шапе индукованог карагенаном (ЦГН) пацова и артритис индукованог адјувансом пацова (АИА)].Када је орални таншинон И показао значајну антиинфламаторну активност против ЦГН индукованог едема шапе (47% инхибиције при 160 мг/кг), док је ИЦ50 индометацина био 7,1 мг/кг.У АИА, таншинон И је дао 27% инхибиције секундарне упале 18. дана у оралној дози од 50 мг/кг/дан, док је преднизолон (5 мг/кг/дан) показао ефикасну инхибицију (65%) [1]

Експеримент са киназом:као извор ПЛА2, хумани рекомбинантни сПЛА2 (тип ИИА) је пречишћен из ЦХО ћелија трансфектованих ПЛА2 геном, а зечји рекомбинантни цПЛА2 тромбоцита је добијен његовом експресијом у бакуловирусу.Стандардна реакциона смеша (200) μ 50) Садржала је 100 мм Трис ХЦл пуфера (пХ 9,0), 6 мМ ЦаЦл2 и 20 нмол 1-ацил - [1-14Ц] - арахидонил Сн глицерол фосфат етаноламин (2000 ЦПМ).Или није било таншинона И. реакција је започета додавањем 50НГ пречишћеног сПЛА2 или цПЛА2.Након 20 минута на 37 ℃, анализиране су произведене слободне масне киселине.Под овим стандардним условима, око 10% слободних масних киселина се ослобађа из додатог фосфолипидног супстрата у реакционој смеши без таншинона И [1].

Експеримент са ћелијама:сирове 264,7 ћелије су култивисане са ДМЕМ допуњеним са 10% ФБС и 1% антибиотика на 37 ℃ испод 5% ЦО2.Укратко, ћелије су засејане на плоче са 96 јажица (2) × 10 (5 ћелија / бунар).Осим ако није другачије назначено, додати су ЛПС (1 уг/мл) и таншинон И и инкубирани 24 сата.Концентрација ПГЕ2 у медијуму је мерена коришћењем ЕИА комплета за ПГЕ2.Да би се утврдио ефекат таншинона И на производњу ПГЕ 2 након индукције ЦОКС-2, ћелије су мешане са ЛПС (1 μ Г / мл) током 24 сата и темељно испране.Затим је додат таншинон И без ЛПС-а и ћелије су култивисане још 24 сата.Концентрација ПГЕ2 је мерена из медијума.МТТ тест је коришћен за испитивање цитотоксичности таншинона И на сировим ћелијама.Таншинон И на 100 μМ није показао никакву цитотоксичност [1].

Експеримент на животињама:Да би се проценила инхибиторна активност таншинона И на акутним и хроничним инфламаторним животињским моделима, коришћени су модели едема шапе индукованог карагенаном (ЦГН) пацова и артритис индукованог адјувансом (АИА).Укратко, 1% ЦГН растворен у физиолошком раствору без пирогена (0,05 мл) је убризган у десну задњу шапу пацова за тест едема шапе.После 5 сати, плетизмографом је измерен оток третираних канџи.Таншинон И растворен у 0,5% ЦМЦ је примењен орално 1 сат пре ЦГН ињекције.За АИА тест, запаљење артритиса је изазвано убризгавањем Мицобацтериум лацтис (0,6мл/пацов) раствореног у минералном уљу у десну задњу шапу пацова.Тансхиноне сам давао орално сваки дан.Експанзија третираних и нетретираних канџи је мерена помоћу плетизмографа.

Референце:[1] Ким СИ, ет ал.Ефекти таншинона И изолованог из Салвиа милтиоррхиза бунге на метаболизам арахидонске киселине и ин виво инфламаторне одговоре.Пхитотхер Рес.2002 Нов;16(7):616-20.