Produkter

Beskrivning:tanshinon I är en human rekombinant sPLA2- och kaninrekombinant cPLA2-hämmare typ IIA med IC50 på 11 μM respektive 82 μM.

Relaterade kategorier:signalvägar > > metaboliska enzymer /
proteaser > > fosfolipider
Forskningsområde > > hjärt-kärlsjukdom
Naturliga produkter > > Kinoner

Mål:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro-studie:tanshinon I hämmade bildningen av PGE2 av LPS-inducerade råa makrofager (IC50 = 38 μM）。 När tanshinon I och LPS tillsattes samtidigt, hämmade föreningen signifikant 10-100 μ PGE2-produktion av M (IC50 = 38 μM) ）。 När tanshinon I tillsattes efter fullständig induktion av COX-2 minskade också produktionen av PGE2 (IC50 = 46) μ M）。 Det faktum att tanshinon I hämmar PGE 2-produktion genom förinducerad COX-2 tyder starkt på att föreningen kan direkt hämmar COX-2-aktivitet och/eller påverkar PLA2-aktivitet. När tanshinon I inkuberades med två olika former av fosfolipas A2 (PLA2), hämmade det sPLA2 signifikant på ett koncentrationsberoende sätt (IC50 = 11) μM). Trots dess låga potens, tanshinon I hämmade också cPLA2 (IC50 = 82) μM）[1]

In vivo-studie:tanshinon I visade antiinflammatorisk aktivitet i karragenaninducerat tassödem och adjuvansinducerad artrit hos råttor.För att fastställa den antiinflammatoriska aktiviteten av tanshinon I, användes klassiska djurmodeller av akut och kronisk inflammation [råttkarragenan (CGN)-inducerat tassödem och adjuvansinducerad artrit från råtta (AIA)].När oral tanshinon I visades signifikant antiinflammatorisk aktivitet mot CGN-inducerat tassödem (47 % hämning vid 160 mg/kg), medan IC50 för indometacin var 7,1 mg/kg.I AIA gav tanshinon I 27 % hämning av sekundär inflammation dag 18 vid en oral dos på 50 mg/kg/dag, medan prednisolon (5 mg/kg/dag) visade effektiv hämning (65%) [1]

Kinasexperiment:som källa till PLA2 renades humant rekombinant sPLA2 (typ IIA) från CHO-celler transfekterade med PLA2-genen, och rekombinant trombocyt-cPLA2 från kanin erhölls genom dess uttryck i baculovirus.Standard reaktionsblandning (200) μ 50) Den innehöll 100 mm Tris HCl-buffert (pH 9,0), 6 mM CaCl2 och 20 nmol 1-acyl - [1-14C] - arakidonyl Sn glycerolfosfatetanolamin (2000 CPM / nmol).Eller så fanns det ingen tanshinon I. reaktionen startade genom att tillsätta 50 NG renat sPLA2 eller cPLA2.Efter 20 minuter vid 37 ℃ analyserades de producerade fria fettsyrorna.Under dessa standardbetingelser frigörs cirka 10 % av de fria fettsyrorna från det tillsatta fosfolipidsubstratet i reaktionsblandningen utan tanshinon I [1].

Cellexperiment:råa 264,7-celler odlades med DMEM kompletterat med 10 % FBS och 1 % antibiotika vid 37 ℃ under 5 % CO2.Kort sagt såddes celler på plattor med 96 brunnar (2) × 10 (5 celler/brunn).Om inget annat anges tillsattes LPS (1 ug/ml) och tanshinon I och inkuberades under 24 timmar.PGE2-koncentrationen i mediet mättes med användning av EIA-kitet för PGE2.För att bestämma effekten av tanshinon I på PGE 2-produktion efter COX-2-induktion blandades cellerna med LPS (1 μG / ml) i 24 timmar och tvättades noggrant.Sedan tillsattes tanshinon I utan LPS och cellerna odlades i ytterligare 24 timmar.PGE2-koncentrationen mättes från mediet.MTT-analys användes för att undersöka cytotoxiciteten av tanshinon I på råa celler.Tanshinon I vid 100 μM visade ingen cytotoxicitet [1].

Djurförsök:För att utvärdera den hämmande aktiviteten av tanshinon I på akuta och kroniska inflammatoriska djurmodeller användes modeller av råttkarragenan (CGN) -inducerat tassödem och adjuvansinducerad artrit (AIA).Kort sagt, 1 % CGN löst i pyrogenfri saltlösning (0,05 ml) injicerades i den högra baktassen på råttor för tassödemtest.Efter 5 timmar mättes svullnaden av de behandlade klorna med användning av en pletysmograf.Tanshinon I löst i 0,5 % CMC administrerades oralt 1 timme före CGN-injektion.För AIA-testet inducerades artritisk inflammation genom att injicera Mycobacterium lactis (0,6 ml/råtta) löst i mineralolja i höger baktass på råttor.Tanshinone Jag fick oralt varje dag.Expansionen av behandlade och obehandlade klor mättes med användning av en pletysmograf.

Referenser:[1] Kim SY, et al.Effekter av Tanshinone I isolerad från Salvia miltiorrhiza bunge på arakidonsyrametabolism och in vivo inflammatoriska svar.Phytother Res.2002 nov;16(7):616-20.