Ürün:% s

Tanım:tanshinone I, IC50'si sırasıyla 11 μ M ve 82 μ M。 olan bir tip IIA insan rekombinant sPLA2 ve Tavşan Rekombinant cPLA2 inhibitörüdür

İlgili Kategoriler:sinyal yolları > > metabolik enzimler /
proteazlar > > fosfolipidler
Araştırma alanı > > kardiyovasküler hastalık
Doğal Ürünler > > Kinonlar

Hedef:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2)[1].

In vitro Çalışma:tanshinone I, LPS ile indüklenen ham makrofajlar tarafından PGE2 oluşumunu inhibe etti (IC50 = 38 μ M）。 Tanshinone I ve LPS aynı anda eklendiğinde, bileşik M'nin 10-100 μ PGE2 üretimini önemli ölçüde inhibe etti (IC50 = 38 μ M) ）。 COX-2'nin tamamen indüklenmesinden sonra eklendiğinde, tanshinone I ayrıca PGE2 üretimini de azalttı (IC50 = 46) μ M）。 Tanshinone I'in önceden indüklenmiş COX-2 yoluyla PGE 2 üretimini inhibe etmesi, bileşiğin COX-2 aktivitesini doğrudan inhibe eder ve/veya PLA2 Aktivitesini etkiler Tanshinon I, iki farklı fosfolipaz A2 (PLA2) formu ile inkübe edildiğinde, konsantrasyona bağlı bir şekilde sPLA2'yi önemli ölçüde inhibe etti (IC50 = 11) μ M.Düşük değerine rağmen potens, tanshinone I ayrıca cPLA2'yi de inhibe etti (IC50 = 82) μ M）[1]

Canlı Çalışmada:tanshinon I, sıçanlarda karagenan kaynaklı pençe ödeminde ve adjuvan kaynaklı artritte anti-inflamatuar aktivite gösterdi.Tanshinon I'in anti-enflamatuar aktivitesini belirlemek için, akut ve kronik inflamasyonun klasik hayvan modelleri [sıçan karagenan (CGN) ile indüklenen pençe ödemi ve sıçan adjuvan ile indüklenen artrit (AIA)] kullanıldı.Oral tanshinon I olduğunda, CGN'nin neden olduğu pençe ödemine (160 mg/kg'da %47 inhibisyon) karşı önemli anti-inflamatuar aktivite gösterirken, indometasinin IC50'si 7.1 mg/kg idi.AIA'da tanshinon I, 50 mg/kg/gün oral dozda 18. günde sekonder inflamasyonda %27 inhibisyon sağlarken, prednizolon (5 mg/kg/gün) etkili inhibisyon (%65) göstermiştir [1]

Kinaz Deneyi:PLA2 kaynağı olarak insan rekombinant sPLA2'si (tip IIA), PLA2 geni ile transfekte edilmiş CHO hücrelerinden saflaştırıldı ve bakulovirüs içindeki ekspresyonu yoluyla tavşan rekombinant trombosit cPLA2 elde edildi.Standart reaksiyon karışımı (200) μ 50) 100 mm Tris HCl tamponu (pH 9.0), 6 mM CaCl2 ve 20 nmol 1-asil - [1-14C] - araşidonil Sn gliserol fosfat etanolamin (2000 CPM / nmol) içeriyordu.Veya tanshinon I yoktu. reaksiyon, 50NG saflaştırılmış sPLA2 veya cPLA2 eklenerek başlatıldı.37°C'de 20 dakika sonra üretilen serbest yağ asitleri analiz edildi.Bu standart koşullar altında, tanshinon I olmadan reaksiyon karışımında eklenen fosfolipid substrattan yaklaşık %10 serbest yağ asitleri salınır [1].

Hücre Deneyi:ham 264.7 hücreler, %5 CO2 altında 37°C'de %10 FBS ve %1 antibiyotik ile desteklenmiş DMEM ile kültürlendi.Kısacası, hücreler 96 oyuklu plakalar (2) x 106 (5 hücre / oyuk) üzerine ekildi.Aksi belirtilmedikçe, LPS (1 ug/ml) ve tanshinon I eklendi ve 24 saat inkübe edildi.Ortamdaki PGE2 konsantrasyonu, PGE2 için EIA kiti kullanılarak ölçüldü.COX-2 indüksiyonundan sonra tanshinon I'in PGE 2 üretimi üzerindeki etkisini belirlemek için hücreler LPS (1 μ G/ml) ile 24 saat karıştırıldı ve iyice yıkandı.Daha sonra LPS olmadan tanshinon I eklendi ve hücreler 24 saat daha kültürlendi.PGE2 konsantrasyonu ortamdan ölçülmüştür.Ham hücreler üzerinde tanshinon I'in sitotoksisitesini incelemek için MTT tahlili kullanıldı.100 μ M'de Tanshinone I herhangi bir sitotoksisite göstermedi [1].

Hayvan Deneyi:akut ve kronik inflamatuar hayvan modellerinde tanshinon I'in inhibitör aktivitesini değerlendirmek için sıçan carrageenan (CGN) ile indüklenen pençe ödemi ve adjuvan ile indüklenen artrit (AIA) modelleri kullanıldı.Kısacası, pençe ödemi testi için sıçanların sağ arka pençesine pirojensiz salin (0,05 mi) içinde çözülmüş %1 CGN enjekte edildi.5 saat sonra, tedavi edilen pençelerin şişmesi bir pletismograf kullanılarak ölçüldü.%0.5 CMC'de çözünen Tanshinone I, CGN enjeksiyonundan 1 saat önce oral yoldan uygulandı.AIA testi için, mineral yağ içinde çözülmüş Mycobacterium lactis (0.6ml/sıçan) sıçanların sağ arka patisine enjekte edilerek artritik inflamasyon indüklenmiştir.Tanshinone her gün oral yoldan uygulandı.İşlem görmüş ve işlem görmemiş pençelerin genişlemesi bir pletismograf kullanılarak ölçüldü.

Referanslar:[1] Kim SY, et al.Salvia miltiorrhiza bunge'den izole edilen Tanshinone I'in araşidonik asit metabolizması ve in vivo inflamatuar yanıtlar üzerindeki etkileri.Fitoter Araş.2002 Kasım;16(7):616-20.