Продукция

Тасвирлау:таншинон I - IIA кеше рекомбинанты sPLA2 һәм куян рекомбинанты cPLA2 ингибиторы, IC50 белән 11 μ M һәм 82 μ M。

Бәйләнешле категорияләр:сигнал юллары >> метаболик ферментлар /
протеазлар >> фосфолипидлар
Тикшеренү өлкәсе >> йөрәк-кан тамырлары авырулары
Табигый продуктлар >> Квиноннар

Максат:IC50: 11 μM (sPLA2), 82 μM (cPLA2) [1].

Витро өйрәнүендә:таншинон I PGE2 формалашуны LPS индуктив чимал макрофаглары белән тыя (IC50 = 38 μ M） tan Таншинон I һәм LPS бер үк вакытта кушылганда, кушылма M (IC50 = 38 μ M) җитештерүне 10-100 μ PGE2 җитештерүне сизелерлек тыя. ） CO COX-2 тулы индукциясеннән соң өстәлгәндә, таншинон I шулай ук ​​PGE2 (IC50 = 46) җитештерүне киметтем μ M） tan Таншинонның PGE 2 производствосын алдан китерелгән COX-2 аша тыюы кушылманың була алуын күрсәтә. турыдан-туры COX-2 эшчәнлеген тыя һәм / яки PLA2 эшчәнлегенә тәэсир итә. Таншинон I ике төрле фосфолипаз А2 (PLA2) белән инкубацияләнгәндә, ул концентрациягә бәйле рәвештә sPLA2-ны сизелерлек тыя (IC50 = 11) μ M). куәт, таншинон I шулай ук ​​cPLA2 (IC50 = 82) μ M inhib [1]

Vivo Study:таншинон Мин каррагеннан индуктив тән шешендә һәм тычканнардагы адвивант индуктив артритта ялкынсынуга каршы активлык күрсәттем.Таншинон I-ның ялкынсынуга каршы эшчәнлеген булдыру өчен, кискен һәм хроник ялкынсынуның классик хайван модельләре [тычкан каррагенен (CGN) - индуктив тәнле шеш һәм тычкан адвивант индуктив артрит (AIA) кулланылды.Таншинон I авызында, ул CGN индуктив тән шешенә каршы зур ялкынсынуга каршы активлык күрсәтте (160 мг / кг 47% тыю), индометасинның IC50 7,1 мг / кг.АИАда таншинон I 18-нче көнне икенчел ялкынсынуны 27% ингибация бирдем, авыз дозасы көненә 50 мг / кг, ә преднисолон (5 мг / кг / көн) эффектив тыю күрсәтте (65%) [1]

Киназ эксперимент:PLA2 чыганагы буларак, кеше рекомбинанты sPLA2 (IIA тибы) PLA2 ген белән күчерелгән CHO күзәнәкләреннән чистартылды, һәм куян рекомбинант тромбоцитлары cPLA2 бакуловируста чагылышы аша алынган.Стандарт реакция катнашмасы (200) μ 50) Анда 100 мм Tris HCl буферы (pH 9.0), 6 мм CaCl2 һәм 20 нмол 1-аксил бар - [1-14C] - арахидонил Сн глицерол фосфат этаноламин (2000 CPM / nmol).Яисә таншинон I. юк иде, реакция 50NG чистартылган sPLA2 яки cPLA2 кушып башланды.37 at 20 минуттан соң җитештерелгән бушлай май кислоталары анализланды.Бу стандарт шартларда 10% бушлай май кислоталары реакция катнашмасында кушылган фосфолипид субстратыннан таншинонсыз I чыгарыла [1].

Күзәнәк эксперименты:чимал 264,7 күзәнәк DMEM белән культураланган, 10% FBS һәм 1% антибиотиклар 37 ℃ 5% CO2 астында.Кыскасы, күзәнәкләр 96 кое тәлинкәгә (2) × 10 (5 күзәнәк / кое) чәчелгән.Башкача күрсәтелмәгән булса, LPS (1уг / мл) һәм таншинон миңа кушылды һәм 24 сәгать инкубацияләнде.Уртадагы PGE2 концентрациясе PGE2 өчен EIA комплекты ярдәмендә үлчәнде.Таншинон Iнең PGE 2 производствосына COX-2 индукциясеннән соң тәэсирен ачыклау өчен, күзәнәкләр LPS (1 μ G / мл) белән 24 сәгать кушылды һәм яхшылап юылды.Аннары, таншинон миңа LPSсыз кушылды һәм күзәнәкләр тагын 24 сәгать культуралы булдылар.PGE2 концентрациясе уртачадан үлчәнде.MTT анализы чимал күзәнәкләрендәге таншинон I цитотоксиклыгын тикшерү өчен кулланылды.Таншинон I 100 μ Мда бернинди цитотоксиклылык күрсәтмәде [1].

Хайваннар эксперименты:Таншинон I-ның ингибитор активлыгын бәяләү өчен, кискен һәм хроник ялкынсынучан хайван модельләрендә, тычкан каррагенен (CGN) - индуктив тәнле шеш һәм адвивант индуктив артрит (AIA) модельләре кулланылды.Кыскасы, пироген ирекле тозда эретелгән 1% CGN (0,05 мл) тычканның уң арткы тәненә тәннең шешен сынау өчен укол салдылар.5 сәгатьтән соң эшкәртелгән тырнакларның шешүе плетисмограф ярдәмендә үлчәнде.Таншинон I 0,5% CMC эретелгән CGN инъекциясенә 1 сәгать кала телдән бирелгән.АИА тесты өчен, артрит ялкынсынуы минераль майда эрелгән Микобактерий лактисын (0,6мл / тычкан) тычканнарның уң арткы тәненә кертеп җибәрде.Таншинон мине көн саен телдән бирделәр.Дәваланган һәм эшкәртелмәгән тырнакларның киңәюе плетисмограф ярдәмендә үлчәнде.

Белешмәләр:[1] Ким С.И., һ.б.Таншинон I тәэсире Сальвия милтиоррхиза бунгыннан арахидон кислотасы метаболизмасына һәм виво ялкынсыну реакцияләренә.Фитотер Рес.2002 ноябрь;16 (7): 616-20.