مصنوعات

تفصیل:ٹینشینون I ایک قسم کا IIA ہیومن ریکومبیننٹ sPLA2 اور Rabbit Recombinant cPLA2 inhibitor ہے جس کا IC50 11 بالترتیب μM اور 82 μM ہے۔

متعلقہ زمرے:سگنلنگ راستے >> میٹابولک انزائمز /
پروٹیز >> فاسفولیپڈس
تحقیق کا میدان >> دل کی بیماری
قدرتی مصنوعات >> کوئنونز

ہدف:IC50: 11 μM (sPLA2)، 82 μM (cPLA2)[1]۔

وٹرو اسٹڈی میں:tanshinone I نے LPS کے ذریعے PGE2 کی تشکیل کو روکا خام میکروفیجز (IC50 = 38 μM）. جب tanshinone I اور LPS کو ایک ہی وقت میں شامل کیا گیا تو مرکب نے M (IC50 = 38 μM) کی 10-100 μPGE2 کی پیداوار کو نمایاں طور پر روک دیا۔ COX-2 کی مکمل شمولیت کے بعد شامل ہونے پر، tanshinone I نے PGE2 (IC50 = 46) μM） کی پیداوار کو بھی کم کر دیا۔ حقیقت یہ ہے کہ tanshinone I PGE 2 کی پیداوار کو پہلے سے induced COX-2 کے ذریعے روکتا ہے سختی سے تجویز کرتا ہے کہ مرکب COX-2 کی سرگرمی کو براہ راست روکتا ہے اور / یا PLA2 سرگرمی کو متاثر کرتا ہے۔ جب tanshinone I کو فاسفولیپیس A2 (PLA2) کی دو مختلف شکلوں کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا، تو اس نے ارتکاز پر منحصر انداز میں (IC50 = 11) μM) نمایاں طور پر sPLA2 کو روکا تھا۔ طاقت، ٹینشینون I نے بھی cPLA2 (IC50 = 82) μ M）[1] کو روکا

Vivo مطالعہ میں:tanshinone I نے چوہوں میں carrageenan induced paw edema اور adjuvant induced arthritis میں سوزش مخالف سرگرمی دکھائی۔tanshinone I کی سوزش مخالف سرگرمی کو قائم کرنے کے لیے، شدید اور دائمی سوزش کے کلاسیکی جانوروں کے ماڈل [چوہے کیریجینن (CGN) - induced paw edema اور rat adjuvant induced arthritis (AIA)] استعمال کیے گئے۔جب زبانی tanshinone I، اس نے CGN induced paw edema (47% inhibition at 160 mg/kg) کے خلاف اہم سوزش کی سرگرمی ظاہر کی، جبکہ indomethacin کا ​​IC50 7.1 mg/kg تھا۔AIA میں، تانشینون I نے 18ویں دن ثانوی سوزش کی 27% روک تھام 50 mg/kg/day کی زبانی خوراک پر دی، جبکہ prednisolone (5 mg/kg/day) نے مؤثر روک تھام (65%) ظاہر کی [1]

کناز کا تجربہ:PLA2 کے ماخذ کے طور پر، انسانی ریکومبیننٹ sPLA2 (ٹائپ IIA) کو PLA2 جین سے منتقلی والے CHO خلیوں سے پاک کیا گیا تھا، اور خرگوش کے دوبارہ پیدا ہونے والے پلیٹلیٹ cPLA2 کو بیکولووائرس میں اس کے اظہار کے ذریعے حاصل کیا گیا تھا۔معیاری رد عمل کا مرکب (200) μ50) اس میں 100 ملی میٹر Tris HCl بفر (pH 9.0)، 6 mM CaCl2 اور 1-acyl کے 20 nmol - [1-14C] - arachidonyl Sn glycerol فاسفیٹ ایتھانولامین (2000nmol CP) شامل تھے۔یا کوئی ٹینشینون I نہیں تھا۔ رد عمل 50NG پیوریفائیڈ sPLA2 یا cPLA2 شامل کرکے شروع کیا گیا تھا۔37 ℃ پر 20 منٹ کے بعد، پیدا ہونے والے مفت فیٹی ایسڈز کا تجزیہ کیا گیا۔ان معیاری حالات کے تحت، تقریباً 10% مفت فیٹی ایسڈز شامل فاسفولیپڈ سبسٹریٹ سے رد عمل کے مرکب میں بغیر تانشینون I [1] کے خارج ہوتے ہیں۔

سیل کا تجربہ:خام 264.7 خلیات کو DMEM کے ساتھ 10% FBS اور 1% اینٹی بایوٹک کے ساتھ 37 ℃ پر 5% CO2 سے کم کیا گیا تھا۔مختصر میں، خلیات کو 96 کنویں پلیٹوں (2) × 10 (5 خلیات / کنویں) پر سیڈ کیا گیا تھا۔جب تک کہ دوسری صورت میں اشارہ نہ کیا گیا ہو، LPS (1ug/ml) اور tanshinone I کو شامل کیا گیا اور 24 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔میڈیم میں PGE2 کی حراستی کو PGE2 کے لیے EIA کٹ کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔COX-2 شامل کرنے کے بعد PGE 2 کی پیداوار پر tanshinone I کے اثر کا تعین کرنے کے لیے، خلیوں کو LPS (1 μG/ml) کے ساتھ 24 گھنٹے تک ملایا گیا اور اچھی طرح دھویا گیا۔اس کے بعد، tanshinone I کو بغیر LPS کے شامل کیا گیا اور خلیات کو مزید 24 گھنٹوں کے لیے کلچر کیا گیا۔PGE2 حراستی درمیانے درجے سے ماپا گیا۔MTT پرکھ کا استعمال خام خلیوں پر ٹینشینون I کی سائٹوٹوکسیٹی کی جانچ کرنے کے لئے کیا گیا تھا۔تانشینون I نے 100 μ M پر کوئی سائٹوٹوکسائٹی نہیں دکھائی [1]۔

جانوروں کا تجربہ:شدید اور دائمی سوزش والے جانوروں کے ماڈلز پر ٹینشینون I کی روک تھام کرنے والی سرگرمی کا جائزہ لینے کے لیے، چوہے کیریجینن (CGN) - induced paw edema اور adjuvant induced arthritis (AIA) ماڈل استعمال کیے گئے۔مختصراً، پائروجن فری نمکین (0.05 ملی لیٹر) میں تحلیل شدہ 1% CGN چوہوں کے دائیں پچھلے پنجے میں پنجے کے ورم کے ٹیسٹ کے لیے لگایا گیا۔5 گھنٹے کے بعد، علاج شدہ پنجوں کی سوجن کو plethysmograph کے ذریعے ماپا گیا۔Tanshinone I کو 0.5% CMC میں تحلیل کیا گیا CGN انجیکشن سے 1 گھنٹہ پہلے زبانی طور پر دیا گیا۔AIA ٹیسٹ کے لیے، چوہوں کے دائیں پچھلے پنجے میں معدنی تیل میں تحلیل ہونے والے Mycobacterium lactis (0.6ml/چوہا) کو انجیکشن لگا کر گٹھیا کی سوزش پیدا کی گئی۔تانشینون مجھے ہر روز زبانی طور پر دیا جاتا تھا۔علاج شدہ اور غیر علاج شدہ پنجوں کی توسیع کو plethysmograph کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔

حوالہ جات:[1] کم ایس وائی، وغیرہ۔تنشینون I کے اثرات arachidonic ایسڈ میٹابولزم اور vivo میں سوزش کے ردعمل میں Salvia miltiorriza bunge سے الگ تھلگ۔Phytother Res.نومبر 2002؛16(7):616-20۔